草业学报
草業學報
초업학보
PRATACULTURAL SCIENCE
2009年
1期
65-71
,共7页
王丽娟%金治平%王能飞%李晓峰%刘公社
王麗娟%金治平%王能飛%李曉峰%劉公社
왕려연%금치평%왕능비%리효봉%류공사
羊草%叶片%cDNA文库%EST
羊草%葉片%cDNA文庫%EST
양초%협편%cDNA문고%EST
采用SMART技术,以品质优良羊草"吉生一号"叶片为材料,构建了高质量cDNA文库.原始文库滴度达到106 cfu/mL,扩增文库滴度接近1011 cfu/mL.随机抽样检查结果表明,插入片断大小在0.5～3.0 kb,主要集中在1 kb左右,其中检测到插入片断大于1 kb的占70%,最大达到2.5 kb,其重组率达到98%.同时在扩增文库中检测到了羊草维生素E合成途径中的关键酶基因α-生育酚环化酶(TC)及γ-生育酚甲基转移酶(γ-TMT)的特异信号,挑选307个筛选出了285条EST序列,将得到的117条非重复序列与GenBank中已知序列比对,获得了如3-磷酸甘油醛脱氢酶、光系统Ⅱ蛋白D1、翻译起始因子蛋白、翻译延生因子蛋白、RNase S-like protein precursor蛋白等基因.羊草高质量的cDNA文库的构建为进一步从分子水平研究羊草及开发利用这一基因资源提供了条件.
採用SMART技術,以品質優良羊草"吉生一號"葉片為材料,構建瞭高質量cDNA文庫.原始文庫滴度達到106 cfu/mL,擴增文庫滴度接近1011 cfu/mL.隨機抽樣檢查結果錶明,插入片斷大小在0.5～3.0 kb,主要集中在1 kb左右,其中檢測到插入片斷大于1 kb的佔70%,最大達到2.5 kb,其重組率達到98%.同時在擴增文庫中檢測到瞭羊草維生素E閤成途徑中的關鍵酶基因α-生育酚環化酶(TC)及γ-生育酚甲基轉移酶(γ-TMT)的特異信號,挑選307箇篩選齣瞭285條EST序列,將得到的117條非重複序列與GenBank中已知序列比對,穫得瞭如3-燐痠甘油醛脫氫酶、光繫統Ⅱ蛋白D1、翻譯起始因子蛋白、翻譯延生因子蛋白、RNase S-like protein precursor蛋白等基因.羊草高質量的cDNA文庫的構建為進一步從分子水平研究羊草及開髮利用這一基因資源提供瞭條件.
채용SMART기술,이품질우량양초"길생일호"협편위재료,구건료고질량cDNA문고.원시문고적도체도106 cfu/mL,확증문고적도접근1011 cfu/mL.수궤추양검사결과표명,삽입편단대소재0.5～3.0 kb,주요집중재1 kb좌우,기중검측도삽입편단대우1 kb적점70%,최대체도2.5 kb,기중조솔체도98%.동시재확증문고중검측도료양초유생소E합성도경중적관건매기인α-생육분배화매(TC)급γ-생육분갑기전이매(γ-TMT)적특이신호,도선307개사선출료285조EST서렬,장득도적117조비중복서렬여GenBank중이지서렬비대,획득료여3-린산감유철탈경매、광계통Ⅱ단백D1、번역기시인자단백、번역연생인자단백、RNase S-like protein precursor단백등기인.양초고질량적cDNA문고적구건위진일보종분자수평연구양초급개발이용저일기인자원제공료조건.
