江苏大学学报(医学版)
江囌大學學報(醫學版)
강소대학학보(의학판)
ACADEMIC JOURNAL OF JIANGSU UNIVERSITY(MEDICINE)
2011年
4期
289-293
,共5页
徐红美%许文林%姚俊%冷加燕%吴晓君%陈巧云
徐紅美%許文林%姚俊%冷加燕%吳曉君%陳巧雲
서홍미%허문림%요준%랭가연%오효군%진교운
mir-216a%真核表达载体%SGC7901/DDP细胞%转染
mir-216a%真覈錶達載體%SGC7901/DDP細胞%轉染
mir-216a%진핵표체재체%SGC7901/DDP세포%전염
目的:构建人mir-216a真核表达载体,实现其在胃癌细胞SGC7901/DDP中的表达,为进一步研究mir-216a的功能打下基础.方法:依据miRBase数据库中pre-mir-216a序列设计引物;PCR扩增pre-mir-216a基因并将其克隆至pGenesil-1载体;将pGenesil-1-hsa-mir-216a质粒转染SGC7901/DDP细胞,RT-PCR及实时定量RCR法检测成熟mir-216a在SGC7901/DDP细胞中的表达.结果:pGenesil-1-hsa-mir-216a质粒经酶切及测序鉴定正确;pGenesil-1-hsa-mir-216a质粒转染进SGC7901/DDP细胞后,RT-PCR检测mir-216a成熟体表达明显增强,实时定量PCR检测S/D/mir-216a组mir-216a成熟体表达较S/D/HK组上调(63.530±0.159)倍(t=1.201,P<0.01).结论:成功构建了pGenesil-1-hsa-mir-216a真核表达质粒,并在胃癌细胞SGC/DDP中高效表达.
目的:構建人mir-216a真覈錶達載體,實現其在胃癌細胞SGC7901/DDP中的錶達,為進一步研究mir-216a的功能打下基礎.方法:依據miRBase數據庫中pre-mir-216a序列設計引物;PCR擴增pre-mir-216a基因併將其剋隆至pGenesil-1載體;將pGenesil-1-hsa-mir-216a質粒轉染SGC7901/DDP細胞,RT-PCR及實時定量RCR法檢測成熟mir-216a在SGC7901/DDP細胞中的錶達.結果:pGenesil-1-hsa-mir-216a質粒經酶切及測序鑒定正確;pGenesil-1-hsa-mir-216a質粒轉染進SGC7901/DDP細胞後,RT-PCR檢測mir-216a成熟體錶達明顯增彊,實時定量PCR檢測S/D/mir-216a組mir-216a成熟體錶達較S/D/HK組上調(63.530±0.159)倍(t=1.201,P<0.01).結論:成功構建瞭pGenesil-1-hsa-mir-216a真覈錶達質粒,併在胃癌細胞SGC/DDP中高效錶達.
목적:구건인mir-216a진핵표체재체,실현기재위암세포SGC7901/DDP중적표체,위진일보연구mir-216a적공능타하기출.방법:의거miRBase수거고중pre-mir-216a서렬설계인물;PCR확증pre-mir-216a기인병장기극륭지pGenesil-1재체;장pGenesil-1-hsa-mir-216a질립전염SGC7901/DDP세포,RT-PCR급실시정량RCR법검측성숙mir-216a재SGC7901/DDP세포중적표체.결과:pGenesil-1-hsa-mir-216a질립경매절급측서감정정학;pGenesil-1-hsa-mir-216a질립전염진SGC7901/DDP세포후,RT-PCR검측mir-216a성숙체표체명현증강,실시정량PCR검측S/D/mir-216a조mir-216a성숙체표체교S/D/HK조상조(63.530±0.159)배(t=1.201,P<0.01).결론:성공구건료pGenesil-1-hsa-mir-216a진핵표체질립,병재위암세포SGC/DDP중고효표체.
