中华传染病杂志
中華傳染病雜誌
중화전염병잡지
CHINESE JOURNAL OF INFECTIOUS DISEASES
2007年
9期
543-546
,共4页
杨雷%张洪勤%吴淑珍%毕云天%包其郁
楊雷%張洪勤%吳淑珍%畢雲天%包其鬱
양뢰%장홍근%오숙진%필운천%포기욱
SARS病毒%刺突蛋白%反转录聚合酶链反应%克隆%分子%基因表达%酵母菌%酿酒
SARS病毒%刺突蛋白%反轉錄聚閤酶鏈反應%剋隆%分子%基因錶達%酵母菌%釀酒
SARS병독%자돌단백%반전록취합매련반응%극륭%분자%기인표체%효모균%양주
目的 构建重组表达质粒pYES6-S,诱导SARS冠状病毒刺突蛋白(spike protein)在酿酒酵母中的表达并纯化.方法 反转录获得SARS冠状病毒DNA片段,PCR法获得刺突蛋白基因互相重叠的四部分片段,酶切连接成全长,在大肠埃希菌E.coli JM109中构建重组表达克隆pYES6-S,在酿酒酵母中诱导表达并纯化.结果 重组克隆pYES6-S经酶切、测序鉴定确定,插入片段大小、方向、碱基匹配与预期一致,获得1个完整的刺突蛋白基因,表达产物纯化后,电泳鉴定,相对分子质量大小近110 000.结论 成功克隆SARS冠状病毒刺突蛋白基因全长,并在酿酒酵母中诱导表达成功,有助于抗SARS分子疫苗的研究.
目的 構建重組錶達質粒pYES6-S,誘導SARS冠狀病毒刺突蛋白(spike protein)在釀酒酵母中的錶達併純化.方法 反轉錄穫得SARS冠狀病毒DNA片段,PCR法穫得刺突蛋白基因互相重疊的四部分片段,酶切連接成全長,在大腸埃希菌E.coli JM109中構建重組錶達剋隆pYES6-S,在釀酒酵母中誘導錶達併純化.結果 重組剋隆pYES6-S經酶切、測序鑒定確定,插入片段大小、方嚮、堿基匹配與預期一緻,穫得1箇完整的刺突蛋白基因,錶達產物純化後,電泳鑒定,相對分子質量大小近110 000.結論 成功剋隆SARS冠狀病毒刺突蛋白基因全長,併在釀酒酵母中誘導錶達成功,有助于抗SARS分子疫苗的研究.
목적 구건중조표체질립pYES6-S,유도SARS관상병독자돌단백(spike protein)재양주효모중적표체병순화.방법 반전록획득SARS관상병독DNA편단,PCR법획득자돌단백기인호상중첩적사부분편단,매절련접성전장,재대장애희균E.coli JM109중구건중조표체극륭pYES6-S,재양주효모중유도표체병순화.결과 중조극륭pYES6-S경매절、측서감정학정,삽입편단대소、방향、감기필배여예기일치,획득1개완정적자돌단백기인,표체산물순화후,전영감정,상대분자질량대소근110 000.결론 성공극륭SARS관상병독자돌단백기인전장,병재양주효모중유도표체성공,유조우항SARS분자역묘적연구.
