中华结核和呼吸杂志
中華結覈和呼吸雜誌
중화결핵화호흡잡지
Chinese Journal of Tuberculosis and Respiratory Diseases
2001年
9期
548-550
,共3页
范雄林%徐志凯%李元%薛莹%李别虎%白光春
範雄林%徐誌凱%李元%薛瑩%李彆虎%白光春
범웅림%서지개%리원%설형%리별호%백광춘
分支杆菌,结核%基因疫苗%免疫原性%抗原,85B
分支桿菌,結覈%基因疫苗%免疫原性%抗原,85B
분지간균,결핵%기인역묘%면역원성%항원,85B
目的构建编码结核分支杆菌(MTB)Ag85B分泌蛋白的重组真核表达质粒,并研究其免疫原性.方法采用聚合酶链反应(PCR)方法从结核分支杆菌H37Ra基因组DNA中扩增出Ag85B分泌蛋白基因,用HindⅢ和EcoRⅠ消化后,与同样酶消化的pcDNA3连接,转化大肠杆菌JM109,阳性克隆用酶切鉴定;重组表达质粒肌注免疫小鼠4周后,分别用dot blotting和ELISA方法检测抗体的产生和滴度.结果酶切鉴定重组表达质粒pTB30s构建成功;dot blotting检测免疫小鼠血清抗Ag85B特异性抗体阳性,ELJSA检测抗体几何平均滴度为1:120.结论应进一步研究pTB30s刺激机体的细胞免疫应答,以用于结核病(TB)的防治研究.
目的構建編碼結覈分支桿菌(MTB)Ag85B分泌蛋白的重組真覈錶達質粒,併研究其免疫原性.方法採用聚閤酶鏈反應(PCR)方法從結覈分支桿菌H37Ra基因組DNA中擴增齣Ag85B分泌蛋白基因,用HindⅢ和EcoRⅠ消化後,與同樣酶消化的pcDNA3連接,轉化大腸桿菌JM109,暘性剋隆用酶切鑒定;重組錶達質粒肌註免疫小鼠4週後,分彆用dot blotting和ELISA方法檢測抗體的產生和滴度.結果酶切鑒定重組錶達質粒pTB30s構建成功;dot blotting檢測免疫小鼠血清抗Ag85B特異性抗體暘性,ELJSA檢測抗體幾何平均滴度為1:120.結論應進一步研究pTB30s刺激機體的細胞免疫應答,以用于結覈病(TB)的防治研究.
목적구건편마결핵분지간균(MTB)Ag85B분비단백적중조진핵표체질립,병연구기면역원성.방법채용취합매련반응(PCR)방법종결핵분지간균H37Ra기인조DNA중확증출Ag85B분비단백기인,용HindⅢ화EcoRⅠ소화후,여동양매소화적pcDNA3련접,전화대장간균JM109,양성극륭용매절감정;중조표체질립기주면역소서4주후,분별용dot blotting화ELISA방법검측항체적산생화적도.결과매절감정중조표체질립pTB30s구건성공;dot blotting검측면역소서혈청항Ag85B특이성항체양성,ELJSA검측항체궤하평균적도위1:120.결론응진일보연구pTB30s자격궤체적세포면역응답,이용우결핵병(TB)적방치연구.
