山东医药
山東醫藥
산동의약
SHANDONG MEDICAL JOURNAL
2012年
32期
31-33,后插3
,共4页
杨春%陈文%钟晓琳%王忠琼%陈枫%夏纪毅
楊春%陳文%鐘曉琳%王忠瓊%陳楓%夏紀毅
양춘%진문%종효림%왕충경%진풍%하기의
丙型肝炎病毒非结构蛋白4B%肝肿瘤%增殖细胞核抗原%周期素蛋白D1
丙型肝炎病毒非結構蛋白4B%肝腫瘤%增殖細胞覈抗原%週期素蛋白D1
병형간염병독비결구단백4B%간종류%증식세포핵항원%주기소단백D1
目的 探讨丙型肝炎病毒非结构蛋白4B(HCV-NS4B)对肝癌细胞增殖及增殖细胞核抗原(PCNA)和周期素D1(cyclinD1)蛋白表达的影响.方法 采用构建好的HCV-NS4B表达载体,以脂质体转染法转染HepG2细胞.RT-PCR、琼脂糖凝胶电泳证实HCV-NS4B在HepG2细胞稳定表达.MTT法绘制生长曲线,观察NS4B对肝细胞生长的影响；流式细胞仪检测细胞周期的情况；免疫细胞化学法检测PCNA和cyclinD1的表达.结果 转染后,生长曲线显示NS4B可促进肝细胞生长；细胞周期检测显示转染NS4B的HepG2细胞进入S期和G2/M期增多(P＜0.05),处于G0/G1期细胞降低(P＜0.05).PCNA和cyclinD1的表达均较空白载体组升高(P＜0.05).结论 HCV-NS4B可干扰肝癌细胞周期,促进肝癌细胞增殖,其作用与上调PCNA、cyclinD1表达有关.
目的 探討丙型肝炎病毒非結構蛋白4B(HCV-NS4B)對肝癌細胞增殖及增殖細胞覈抗原(PCNA)和週期素D1(cyclinD1)蛋白錶達的影響.方法 採用構建好的HCV-NS4B錶達載體,以脂質體轉染法轉染HepG2細胞.RT-PCR、瓊脂糖凝膠電泳證實HCV-NS4B在HepG2細胞穩定錶達.MTT法繪製生長麯線,觀察NS4B對肝細胞生長的影響；流式細胞儀檢測細胞週期的情況；免疫細胞化學法檢測PCNA和cyclinD1的錶達.結果 轉染後,生長麯線顯示NS4B可促進肝細胞生長；細胞週期檢測顯示轉染NS4B的HepG2細胞進入S期和G2/M期增多(P＜0.05),處于G0/G1期細胞降低(P＜0.05).PCNA和cyclinD1的錶達均較空白載體組升高(P＜0.05).結論 HCV-NS4B可榦擾肝癌細胞週期,促進肝癌細胞增殖,其作用與上調PCNA、cyclinD1錶達有關.
목적 탐토병형간염병독비결구단백4B(HCV-NS4B)대간암세포증식급증식세포핵항원(PCNA)화주기소D1(cyclinD1)단백표체적영향.방법 채용구건호적HCV-NS4B표체재체,이지질체전염법전염HepG2세포.RT-PCR、경지당응효전영증실HCV-NS4B재HepG2세포은정표체.MTT법회제생장곡선,관찰NS4B대간세포생장적영향；류식세포의검측세포주기적정황；면역세포화학법검측PCNA화cyclinD1적표체.결과 전염후,생장곡선현시NS4B가촉진간세포생장；세포주기검측현시전염NS4B적HepG2세포진입S기화G2/M기증다(P＜0.05),처우G0/G1기세포강저(P＜0.05).PCNA화cyclinD1적표체균교공백재체조승고(P＜0.05).결론 HCV-NS4B가간우간암세포주기,촉진간암세포증식,기작용여상조PCNA、cyclinD1표체유관.
