中国分子心脏病学杂志
中國分子心髒病學雜誌
중국분자심장병학잡지
MOLECULAR CARDIOLOGY OF CHINA
2012年
2期
95-98
,共4页
王芳%聂宇%杨晋静%韩变梅%丛祥凤%陈曦
王芳%聶宇%楊晉靜%韓變梅%叢祥鳳%陳晞
왕방%섭우%양진정%한변매%총상봉%진희
LPA受体%心肌细胞%基因序列分析%重组质粒
LPA受體%心肌細胞%基因序列分析%重組質粒
LPA수체%심기세포%기인서렬분석%중조질립
目的 确定5种亚型溶血磷脂酸受体(LPAR)基因在大鼠心肌细胞中的表达,针对主要分布亚型LPAR3基因构建重组质粒.方法 利用实时荧光定量PCR和Western Blot检测LPA受体亚型在原代培养乳鼠心肌细胞的表达量;克隆LPAR3基因的编码区全序列,构建重组质粒.结果 在5种LPAR亚型中,LPAR3在心肌细胞中的表达最高,其次为LPAR1,LPAR4和LPAR5在心肌细胞中的表达较低,而LPAR2则未检测到;Western Blot检测显示LPAR3的表达明显高于LPAR1的表达.对LPAR3基因进行序列分析,结果显示GenBank中序列号为NM_023969.1的序列与其它物种的该序列比较,缺失了一段保守的碱基片段;根据另一条序列(AB051164.1)设计引物,成功扩增LPAR3全基因片段,构建重组质粒.结论 LPAR3是大鼠心肌细胞中主要的溶血磷脂受体亚型; GenBank中序列号为NM_023969.1的LPAR3基因序列存在碱基缺失,大鼠中编码LPAR3的正确序列为AB051164.1.
目的 確定5種亞型溶血燐脂痠受體(LPAR)基因在大鼠心肌細胞中的錶達,針對主要分佈亞型LPAR3基因構建重組質粒.方法 利用實時熒光定量PCR和Western Blot檢測LPA受體亞型在原代培養乳鼠心肌細胞的錶達量;剋隆LPAR3基因的編碼區全序列,構建重組質粒.結果 在5種LPAR亞型中,LPAR3在心肌細胞中的錶達最高,其次為LPAR1,LPAR4和LPAR5在心肌細胞中的錶達較低,而LPAR2則未檢測到;Western Blot檢測顯示LPAR3的錶達明顯高于LPAR1的錶達.對LPAR3基因進行序列分析,結果顯示GenBank中序列號為NM_023969.1的序列與其它物種的該序列比較,缺失瞭一段保守的堿基片段;根據另一條序列(AB051164.1)設計引物,成功擴增LPAR3全基因片段,構建重組質粒.結論 LPAR3是大鼠心肌細胞中主要的溶血燐脂受體亞型; GenBank中序列號為NM_023969.1的LPAR3基因序列存在堿基缺失,大鼠中編碼LPAR3的正確序列為AB051164.1.
목적 학정5충아형용혈린지산수체(LPAR)기인재대서심기세포중적표체,침대주요분포아형LPAR3기인구건중조질립.방법 이용실시형광정량PCR화Western Blot검측LPA수체아형재원대배양유서심기세포적표체량;극륭LPAR3기인적편마구전서렬,구건중조질립.결과 재5충LPAR아형중,LPAR3재심기세포중적표체최고,기차위LPAR1,LPAR4화LPAR5재심기세포중적표체교저,이LPAR2칙미검측도;Western Blot검측현시LPAR3적표체명현고우LPAR1적표체.대LPAR3기인진행서렬분석,결과현시GenBank중서렬호위NM_023969.1적서렬여기타물충적해서렬비교,결실료일단보수적감기편단;근거령일조서렬(AB051164.1)설계인물,성공확증LPAR3전기인편단,구건중조질립.결론 LPAR3시대서심기세포중주요적용혈린지수체아형; GenBank중서렬호위NM_023969.1적LPAR3기인서렬존재감기결실,대서중편마LPAR3적정학서렬위AB051164.1.