畜牧兽医学报
畜牧獸醫學報
축목수의학보
2012年
8期
1260-1265
,共6页
流感病毒,H3N2%神经氨酸酶NA%抗药性%反向遗传学
流感病毒,H3N2%神經氨痠酶NA%抗藥性%反嚮遺傳學
류감병독,H3N2%신경안산매NA%항약성%반향유전학
为验证流感病毒H3N2神经氨酸酶上2个抗药性的关键位点,利用反向遗传学手段,8个质粒共同转染293T细胞,包装带有双点突变(第119位氨基酸由E突变为V,第222为氨基酸由I突变成L)、单点突变和野生型的流感病毒H3N2;在MDCK细胞中传代包装成的H3N2病毒,检测不同感染时间和有无抗流感病毒药物(奥司他韦)存在下病毒的滴度.结果表明,野生流感病毒H3N2和其突变株包装成功,第119位氨基酸单点突变型滴度与野生型的相近,而第222位氨基酸单点突变和双突变型滴度要比野生型的低；双点突变株相比野生株具有很高的抗奥司他韦的生物活性,而单点突变型不具有抗药活性.本试验成功证明了H3N2神经氨酸酶上2个位点(第119和222位氨基酸)对病毒抗药性起到关键的作用,且只有双点同时突变的条件下,病毒才会有抗奥司他韦的生物活性.
為驗證流感病毒H3N2神經氨痠酶上2箇抗藥性的關鍵位點,利用反嚮遺傳學手段,8箇質粒共同轉染293T細胞,包裝帶有雙點突變(第119位氨基痠由E突變為V,第222為氨基痠由I突變成L)、單點突變和野生型的流感病毒H3N2;在MDCK細胞中傳代包裝成的H3N2病毒,檢測不同感染時間和有無抗流感病毒藥物(奧司他韋)存在下病毒的滴度.結果錶明,野生流感病毒H3N2和其突變株包裝成功,第119位氨基痠單點突變型滴度與野生型的相近,而第222位氨基痠單點突變和雙突變型滴度要比野生型的低；雙點突變株相比野生株具有很高的抗奧司他韋的生物活性,而單點突變型不具有抗藥活性.本試驗成功證明瞭H3N2神經氨痠酶上2箇位點(第119和222位氨基痠)對病毒抗藥性起到關鍵的作用,且隻有雙點同時突變的條件下,病毒纔會有抗奧司他韋的生物活性.
위험증류감병독H3N2신경안산매상2개항약성적관건위점,이용반향유전학수단,8개질립공동전염293T세포,포장대유쌍점돌변(제119위안기산유E돌변위V,제222위안기산유I돌변성L)、단점돌변화야생형적류감병독H3N2;재MDCK세포중전대포장성적H3N2병독,검측불동감염시간화유무항류감병독약물(오사타위)존재하병독적적도.결과표명,야생류감병독H3N2화기돌변주포장성공,제119위안기산단점돌변형적도여야생형적상근,이제222위안기산단점돌변화쌍돌변형적도요비야생형적저；쌍점돌변주상비야생주구유흔고적항오사타위적생물활성,이단점돌변형불구유항약활성.본시험성공증명료H3N2신경안산매상2개위점(제119화222위안기산)대병독항약성기도관건적작용,차지유쌍점동시돌변적조건하,병독재회유항오사타위적생물활성.
