水生生物学报
水生生物學報
수생생물학보
ACTA HYDROBIOLOGICA SINICA
2012年
2期
205-211
,共7页
曾柳根%徐灵%王军花%盛军庆%辜清%彭扣%洪一江
曾柳根%徐靈%王軍花%盛軍慶%辜清%彭釦%洪一江
증류근%서령%왕군화%성군경%고청%팽구%홍일강
池蝶蚌%Sox2基因%性腺%荧光定量PCR%表达分析
池蝶蚌%Sox2基因%性腺%熒光定量PCR%錶達分析
지접방%Sox2기인%성선%형광정량PCR%표체분석
Sox基因家族在胚胎发育过程和性别分化中起重要作用,为研究池蝶蚌中Sox基因的功能,以人SRY基因HMG-box保守区的序列设计简并引物,以雌、雄池蝶蚌基因组DNA和精巢cDNA为模板进行扩增,获得了2个不完全相同的序列,分别为DNA-HMG1、DNA-HMG2和cDNA-HMG,长度均为220 bp,编码73个氨基酸.与人等物种Sox1、Sox2、Sox3及Sox14有很高的同源性,雌雄个体之间没有序列差异性.采用RACE-PCR扩增获得了池蝶蚌性腺Sox2部分cDNA片段,长度为1774 bp,该序列核苷酸与欧洲帽贝的SoxB和人类的Sox2的同源性最高;在部分开放阅读框249个氨基酸残基中,具有Sox家族典型的HMG-box结构域,与人类、小鼠、原鸡和斑马鱼等Sox2的HMG-box同源性为98%.为了解该基因在各组织中的表达情况,采用实时荧光定量PCR方法分析了外套膜、闭壳肌、鳃、肠、肝、肾、精巢和卵巢在内的8种组织hs-Sox2的表达情况,结果显示,hs-Sox2基因在8种组织中均有表达,其中在肾脏中的表达量最高,其次是肠与闭壳肌,在雄性性腺中的表达量明显高于雌性性腺,在肝脏中的表达量最低;为了解hs-Sox2在不同性腺发育时期的表达情况,采用实时荧光定量PCR方法分析了5个不同月龄的精巢组织中hs-Sox2的表达情况,结果显示在39月龄性腺的表达量最高,其次是16月龄性腺,63月龄蚌中的表达量最少.以上结果表明,hs-Sox2基因可能参与了池蝶蚌精巢的发育及功能的维持.
Sox基因傢族在胚胎髮育過程和性彆分化中起重要作用,為研究池蝶蚌中Sox基因的功能,以人SRY基因HMG-box保守區的序列設計簡併引物,以雌、雄池蝶蚌基因組DNA和精巢cDNA為模闆進行擴增,穫得瞭2箇不完全相同的序列,分彆為DNA-HMG1、DNA-HMG2和cDNA-HMG,長度均為220 bp,編碼73箇氨基痠.與人等物種Sox1、Sox2、Sox3及Sox14有很高的同源性,雌雄箇體之間沒有序列差異性.採用RACE-PCR擴增穫得瞭池蝶蚌性腺Sox2部分cDNA片段,長度為1774 bp,該序列覈苷痠與歐洲帽貝的SoxB和人類的Sox2的同源性最高;在部分開放閱讀框249箇氨基痠殘基中,具有Sox傢族典型的HMG-box結構域,與人類、小鼠、原鷄和斑馬魚等Sox2的HMG-box同源性為98%.為瞭解該基因在各組織中的錶達情況,採用實時熒光定量PCR方法分析瞭外套膜、閉殼肌、鰓、腸、肝、腎、精巢和卵巢在內的8種組織hs-Sox2的錶達情況,結果顯示,hs-Sox2基因在8種組織中均有錶達,其中在腎髒中的錶達量最高,其次是腸與閉殼肌,在雄性性腺中的錶達量明顯高于雌性性腺,在肝髒中的錶達量最低;為瞭解hs-Sox2在不同性腺髮育時期的錶達情況,採用實時熒光定量PCR方法分析瞭5箇不同月齡的精巢組織中hs-Sox2的錶達情況,結果顯示在39月齡性腺的錶達量最高,其次是16月齡性腺,63月齡蚌中的錶達量最少.以上結果錶明,hs-Sox2基因可能參與瞭池蝶蚌精巢的髮育及功能的維持.
Sox기인가족재배태발육과정화성별분화중기중요작용,위연구지접방중Sox기인적공능,이인SRY기인HMG-box보수구적서렬설계간병인물,이자、웅지접방기인조DNA화정소cDNA위모판진행확증,획득료2개불완전상동적서렬,분별위DNA-HMG1、DNA-HMG2화cDNA-HMG,장도균위220 bp,편마73개안기산.여인등물충Sox1、Sox2、Sox3급Sox14유흔고적동원성,자웅개체지간몰유서렬차이성.채용RACE-PCR확증획득료지접방성선Sox2부분cDNA편단,장도위1774 bp,해서렬핵감산여구주모패적SoxB화인류적Sox2적동원성최고;재부분개방열독광249개안기산잔기중,구유Sox가족전형적HMG-box결구역,여인류、소서、원계화반마어등Sox2적HMG-box동원성위98%.위료해해기인재각조직중적표체정황,채용실시형광정량PCR방법분석료외투막、폐각기、새、장、간、신、정소화란소재내적8충조직hs-Sox2적표체정황,결과현시,hs-Sox2기인재8충조직중균유표체,기중재신장중적표체량최고,기차시장여폐각기,재웅성성선중적표체량명현고우자성성선,재간장중적표체량최저;위료해hs-Sox2재불동성선발육시기적표체정황,채용실시형광정량PCR방법분석료5개불동월령적정소조직중hs-Sox2적표체정황,결과현시재39월령성선적표체량최고,기차시16월령성선,63월령방중적표체량최소.이상결과표명,hs-Sox2기인가능삼여료지접방정소적발육급공능적유지.