中国畜牧兽医
中國畜牧獸醫
중국축목수의
CHINA ANIMAL HUSBANDRY & VETERINARY MEDICINE
2012年
1期
92-97
,共6页
朱孟芝%董雅娟%龚宜超%王文明%刘玮%柏学进
硃孟芝%董雅娟%龔宜超%王文明%劉瑋%柏學進
주맹지%동아연%공의초%왕문명%류위%백학진
布莱凯特黑牛%骨髓间充质干细胞%表皮生长因子%胰岛素%催乳素%孕酮%乳腺样上皮细胞
佈萊凱特黑牛%骨髓間充質榦細胞%錶皮生長因子%胰島素%催乳素%孕酮%乳腺樣上皮細胞
포래개특흑우%골수간충질간세포%표피생장인자%이도소%최유소%잉동%유선양상피세포
为培育转基因肉牛提供种子细胞及进一步丰富牛骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSC)的多向分化潜能,本试验利用细胞免疫荧光染色方法和分子生物学方法初步探讨在表皮生长因子、胰岛素、催产素和孕酮等条件下,体外诱导牛BMSC向乳腺样上皮细胞分化的可能性.利用不同浓度的诱导液对纯化稳定的P4、P8和P12代牛BM-SC进行体外诱导,并对诱导后的细胞进行细胞免疫荧光观察和RT-PCR鉴定.结果显示,诱导后部分BMSC细胞呈多角形,而不再呈明显的梭形和纺锤形,经细胞角蛋白18免疫荧光染色后出现明显的荧光.P4代牛BMSC在诱导液Ⅱ的诱导作用下分化效果显著.RT-PCR结果显示,诱导分化后细胞角蛋白19基因、β-酪蛋白基因及αs1-酪蛋白基因在细胞中表达.因此,在体外,多因子联合诱导可使牛BMSC初步分化为乳腺样上皮细胞并且在诱导液Ⅱ的联合诱导下分化作用最明显.
為培育轉基因肉牛提供種子細胞及進一步豐富牛骨髓間充質榦細胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSC)的多嚮分化潛能,本試驗利用細胞免疫熒光染色方法和分子生物學方法初步探討在錶皮生長因子、胰島素、催產素和孕酮等條件下,體外誘導牛BMSC嚮乳腺樣上皮細胞分化的可能性.利用不同濃度的誘導液對純化穩定的P4、P8和P12代牛BM-SC進行體外誘導,併對誘導後的細胞進行細胞免疫熒光觀察和RT-PCR鑒定.結果顯示,誘導後部分BMSC細胞呈多角形,而不再呈明顯的梭形和紡錘形,經細胞角蛋白18免疫熒光染色後齣現明顯的熒光.P4代牛BMSC在誘導液Ⅱ的誘導作用下分化效果顯著.RT-PCR結果顯示,誘導分化後細胞角蛋白19基因、β-酪蛋白基因及αs1-酪蛋白基因在細胞中錶達.因此,在體外,多因子聯閤誘導可使牛BMSC初步分化為乳腺樣上皮細胞併且在誘導液Ⅱ的聯閤誘導下分化作用最明顯.
위배육전기인육우제공충자세포급진일보봉부우골수간충질간세포(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSC)적다향분화잠능,본시험이용세포면역형광염색방법화분자생물학방법초보탐토재표피생장인자、이도소、최산소화잉동등조건하,체외유도우BMSC향유선양상피세포분화적가능성.이용불동농도적유도액대순화은정적P4、P8화P12대우BM-SC진행체외유도,병대유도후적세포진행세포면역형광관찰화RT-PCR감정.결과현시,유도후부분BMSC세포정다각형,이불재정명현적사형화방추형,경세포각단백18면역형광염색후출현명현적형광.P4대우BMSC재유도액Ⅱ적유도작용하분화효과현저.RT-PCR결과현시,유도분화후세포각단백19기인、β-락단백기인급αs1-락단백기인재세포중표체.인차,재체외,다인자연합유도가사우BMSC초보분화위유선양상피세포병차재유도액Ⅱ적연합유도하분화작용최명현.
