临床心血管病杂志
臨床心血管病雜誌
림상심혈관병잡지
JOURNAL OF CLINICAL CARDIOLOGY
2009年
2期
149-151
,共3页
王治校%李小林%林静%周运锋%王磊%李大主
王治校%李小林%林靜%週運鋒%王磊%李大主
왕치교%리소림%림정%주운봉%왕뢰%리대주
动脉粥样硬化%FOXP3基因%RNA干扰%慢病毒载体%调节性T细胞
動脈粥樣硬化%FOXP3基因%RNA榦擾%慢病毒載體%調節性T細胞
동맥죽양경화%FOXP3기인%RNA간우%만병독재체%조절성T세포
目的:构建小鼠FOXP3基因特异性siRNA慢病毒载体,并对其进行功能性研究.方法:根据GeneBank提供的小鼠FOXP3cDNA序列,设计4条RNA干扰靶点序列,制备双链DNA oligo,与制备好的双酶切慢病毒载体连接,再转入细菌感受态细胞DH-5a,行PCR鉴定出阳性克隆并测序,制备成FOXP3-siRNA慢病毒载体,利用Western-blot方法对构建的载体进行功能性研究;将载体通过尾静脉注入小鼠体内,观察其对小鼠动脉粥样硬化形成的影响.结果:构建的小鼠FOXP3基因siRNA慢病毒载体,经PCR和DNA测序证实与设计完全一致,并对Foxp3+CD4+CD25+调节性T细胞有显著敲减效应;其能显著促进动脉粥样硬化形成.结论:体内外实验表明,成功构建了小鼠FOXP3基因的特异性siRNA慢病毒载体.
目的:構建小鼠FOXP3基因特異性siRNA慢病毒載體,併對其進行功能性研究.方法:根據GeneBank提供的小鼠FOXP3cDNA序列,設計4條RNA榦擾靶點序列,製備雙鏈DNA oligo,與製備好的雙酶切慢病毒載體連接,再轉入細菌感受態細胞DH-5a,行PCR鑒定齣暘性剋隆併測序,製備成FOXP3-siRNA慢病毒載體,利用Western-blot方法對構建的載體進行功能性研究;將載體通過尾靜脈註入小鼠體內,觀察其對小鼠動脈粥樣硬化形成的影響.結果:構建的小鼠FOXP3基因siRNA慢病毒載體,經PCR和DNA測序證實與設計完全一緻,併對Foxp3+CD4+CD25+調節性T細胞有顯著敲減效應;其能顯著促進動脈粥樣硬化形成.結論:體內外實驗錶明,成功構建瞭小鼠FOXP3基因的特異性siRNA慢病毒載體.
목적:구건소서FOXP3기인특이성siRNA만병독재체,병대기진행공능성연구.방법:근거GeneBank제공적소서FOXP3cDNA서렬,설계4조RNA간우파점서렬,제비쌍련DNA oligo,여제비호적쌍매절만병독재체련접,재전입세균감수태세포DH-5a,행PCR감정출양성극륭병측서,제비성FOXP3-siRNA만병독재체,이용Western-blot방법대구건적재체진행공능성연구;장재체통과미정맥주입소서체내,관찰기대소서동맥죽양경화형성적영향.결과:구건적소서FOXP3기인siRNA만병독재체,경PCR화DNA측서증실여설계완전일치,병대Foxp3+CD4+CD25+조절성T세포유현저고감효응;기능현저촉진동맥죽양경화형성.결론:체내외실험표명,성공구건료소서FOXP3기인적특이성siRNA만병독재체.
