渔业科学进展
漁業科學進展
어업과학진전
MARINE FISHERIES RESEARCH
2009年
3期
49-54
,共6页
淋巴囊肿病毒%超速离心%分离纯化%免疫特性比较
淋巴囊腫病毒%超速離心%分離純化%免疫特性比較
림파낭종병독%초속리심%분리순화%면역특성비교
比较了3种不同的牙鲆淋巴囊肿病毒纯化方法,优化后的方法如下:剥离囊肿表面薄膜,收集内容物,匀浆后再用超声波细胞破碎仪破碎,反复冻融,650×g、1 800×g差速离心,30%(W/W)蔗糖垫底超速离心(78 500×g)浓缩病毒,最后蔗糖密度梯度超速离心(78 500×g)纯化病毒.电镜观察发现,出现在47%～52%蔗糖密度区域的病毒带含有多量、纯净和结构一致的病毒粒子.此外,利用制备的兔抗血清对不同地区的病毒进行了免疫特性分析,Western blotting检测显示来自威海、青岛及秦皇岛3个地区的淋巴囊肿病毒反应结果是一致的,均有3条蛋白带发生反应,其分子量分别为125、66和55kDa.
比較瞭3種不同的牙鲆淋巴囊腫病毒純化方法,優化後的方法如下:剝離囊腫錶麵薄膜,收集內容物,勻漿後再用超聲波細胞破碎儀破碎,反複凍融,650×g、1 800×g差速離心,30%(W/W)蔗糖墊底超速離心(78 500×g)濃縮病毒,最後蔗糖密度梯度超速離心(78 500×g)純化病毒.電鏡觀察髮現,齣現在47%～52%蔗糖密度區域的病毒帶含有多量、純淨和結構一緻的病毒粒子.此外,利用製備的兔抗血清對不同地區的病毒進行瞭免疫特性分析,Western blotting檢測顯示來自威海、青島及秦皇島3箇地區的淋巴囊腫病毒反應結果是一緻的,均有3條蛋白帶髮生反應,其分子量分彆為125、66和55kDa.
비교료3충불동적아평림파낭종병독순화방법,우화후적방법여하:박리낭종표면박막,수집내용물,균장후재용초성파세포파쇄의파쇄,반복동융,650×g、1 800×g차속리심,30%(W/W)자당점저초속리심(78 500×g)농축병독,최후자당밀도제도초속리심(78 500×g)순화병독.전경관찰발현,출현재47%～52%자당밀도구역적병독대함유다량、순정화결구일치적병독입자.차외,이용제비적토항혈청대불동지구적병독진행료면역특성분석,Western blotting검측현시래자위해、청도급진황도3개지구적림파낭종병독반응결과시일치적,균유3조단백대발생반응,기분자량분별위125、66화55kDa.
