生物化学与生物物理进展
生物化學與生物物理進展
생물화학여생물물리진전
PROGRESS IN BIOCHEMISTRY AND BIOPHYSICS
2009年
7期
823-829
,共7页
商瑜%徐夏莲%辛宏%常智杰
商瑜%徐夏蓮%辛宏%常智傑
상유%서하련%신굉%상지걸
条件基因沉默%CHIP%TGF-β%抑制性调控
條件基因沉默%CHIP%TGF-β%抑製性調控
조건기인침묵%CHIP%TGF-β%억제성조공
根据条件基因敲除技术和基因沉默的理论,构建了可被CRE操控的条件基因沉默系统,并应用其研究分子伴侣相互作用蛋白CHIP(C-terminus of Hsc70-interacting protein)对TGF-β信号通路的调控.RT-PCR和免疫印迹结果显示,pLoxP/CHIPi与CRE相瓦作用后,可以有效地降低内源CHIP的mRNA水平,减少外源和内源CHIP的蛋白质量.荧光素酶报告系统分析表明,条件基因沉默能解除CHIP对TGF-β信号通路的抑制性调控,增强TGF-β信号通路的转录活性.结果表明,CRE依赖的条件基因沉默系统具有高效性、特异性,并通过它反向验证了CHIP对TGF-β信号通路的抑制性调控,为进一步研究与CHIP相关的TGF-β信号通路所致疾病的发生机理提供了有效工具.
根據條件基因敲除技術和基因沉默的理論,構建瞭可被CRE操控的條件基因沉默繫統,併應用其研究分子伴侶相互作用蛋白CHIP(C-terminus of Hsc70-interacting protein)對TGF-β信號通路的調控.RT-PCR和免疫印跡結果顯示,pLoxP/CHIPi與CRE相瓦作用後,可以有效地降低內源CHIP的mRNA水平,減少外源和內源CHIP的蛋白質量.熒光素酶報告繫統分析錶明,條件基因沉默能解除CHIP對TGF-β信號通路的抑製性調控,增彊TGF-β信號通路的轉錄活性.結果錶明,CRE依賴的條件基因沉默繫統具有高效性、特異性,併通過它反嚮驗證瞭CHIP對TGF-β信號通路的抑製性調控,為進一步研究與CHIP相關的TGF-β信號通路所緻疾病的髮生機理提供瞭有效工具.
근거조건기인고제기술화기인침묵적이론,구건료가피CRE조공적조건기인침묵계통,병응용기연구분자반려상호작용단백CHIP(C-terminus of Hsc70-interacting protein)대TGF-β신호통로적조공.RT-PCR화면역인적결과현시,pLoxP/CHIPi여CRE상와작용후,가이유효지강저내원CHIP적mRNA수평,감소외원화내원CHIP적단백질량.형광소매보고계통분석표명,조건기인침묵능해제CHIP대TGF-β신호통로적억제성조공,증강TGF-β신호통로적전록활성.결과표명,CRE의뢰적조건기인침묵계통구유고효성、특이성,병통과타반향험증료CHIP대TGF-β신호통로적억제성조공,위진일보연구여CHIP상관적TGF-β신호통로소치질병적발생궤리제공료유효공구.
