中国实用医药
中國實用醫藥
중국실용의약
CHINA PRACTICAL MEDICAL
2009年
10期
8-10
,共3页
Id1%真核表达载体%乳腺癌
Id1%真覈錶達載體%乳腺癌
Id1%진핵표체재체%유선암
目的 构建正义、反义Id1真核表达载体,并成功转染乳腺癌MDA-MB-231细胞系,筛选稳定表达细胞株.方法 设计针对Id1基因的mRNA效的干扰序列.将干扰序列插入pcDNA6.2-GW/EmGFP-miR 表达载体,构建Id1 miRNA真核表达载体,脂质体转染法转染乳腺癌MDA-MB-231细胞系,杀稻瘟霉素筛选稳定表达的细胞株.结果 Id1 miRNA真核表达载体的构建后,经酶切及测序鉴定正确后.转染乳腺癌MDA-MB231细胞系.经过2周杀稻瘟霉素筛选,获得稳定表达的细胞系.经RT-PCR鉴定,转染Id1 miRNA真核表达载体的细胞系Id1表达水平低于对照组.未转染组与阴性对照转染组无明显差异.
目的 構建正義、反義Id1真覈錶達載體,併成功轉染乳腺癌MDA-MB-231細胞繫,篩選穩定錶達細胞株.方法 設計針對Id1基因的mRNA效的榦擾序列.將榦擾序列插入pcDNA6.2-GW/EmGFP-miR 錶達載體,構建Id1 miRNA真覈錶達載體,脂質體轉染法轉染乳腺癌MDA-MB-231細胞繫,殺稻瘟黴素篩選穩定錶達的細胞株.結果 Id1 miRNA真覈錶達載體的構建後,經酶切及測序鑒定正確後.轉染乳腺癌MDA-MB231細胞繫.經過2週殺稻瘟黴素篩選,穫得穩定錶達的細胞繫.經RT-PCR鑒定,轉染Id1 miRNA真覈錶達載體的細胞繫Id1錶達水平低于對照組.未轉染組與陰性對照轉染組無明顯差異.
목적 구건정의、반의Id1진핵표체재체,병성공전염유선암MDA-MB-231세포계,사선은정표체세포주.방법 설계침대Id1기인적mRNA효적간우서렬.장간우서렬삽입pcDNA6.2-GW/EmGFP-miR 표체재체,구건Id1 miRNA진핵표체재체,지질체전염법전염유선암MDA-MB-231세포계,살도온매소사선은정표체적세포주.결과 Id1 miRNA진핵표체재체적구건후,경매절급측서감정정학후.전염유선암MDA-MB231세포계.경과2주살도온매소사선,획득은정표체적세포계.경RT-PCR감정,전염Id1 miRNA진핵표체재체적세포계Id1표체수평저우대조조.미전염조여음성대조전염조무명현차이.
