中国生物制品学杂志
中國生物製品學雜誌
중국생물제품학잡지
CHINESE JOURNAL OF BIOLOGICALS
2008年
12期
1090-1093
,共4页
李萍%蒋琳%马亚茹%鱼轲%郭敏%陆俭
李萍%蔣琳%馬亞茹%魚軻%郭敏%陸儉
리평%장림%마아여%어가%곽민%륙검
肿瘤坏死因子-α%单克隆抗体%中和活性
腫瘤壞死因子-α%單剋隆抗體%中和活性
종류배사인자-α%단극륭항체%중화활성
目的 制备高中和活性的鼠抗肿瘤坏死因子-α(TNF-α)单克隆抗体,并进行鉴定.方法 用重组TNF-α免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备抗TNF-α单抗,纯化后,用间接ELISA法和微量细胞病变MTT法柃测抗体效价,ELISA相加试验测定抗原表位,硫氰酸铵洗脱法测定单抗的相对亲和力指数,并进行类及亚类、细胞染色体核型、特异性及稳定性检测.结果 筛选出7株分泌抗TNF单克隆抗体的细胞株,其中6株具有较高的中和活性和良好的稳定性,其细胞上清及腹水的中和效价分别为1:40～1:160和(1～3)×10-4 7株单抗均为IgG类IgG1亚类,轻链类型均为K,细胞核型分析符合杂交瘤细胞特征,特异性良好,5H10株与其余6株有不同的抗原表位,相对亲和力指数为0.4～1.5 mol/L.结论 已成功制备具有高中和活性的鼠抗TNF-α单克隆抗体,为抗人TNF-α嵌合抗体的构建奠定了基础.
目的 製備高中和活性的鼠抗腫瘤壞死因子-α(TNF-α)單剋隆抗體,併進行鑒定.方法 用重組TNF-α免疫BALB/c小鼠,採用雜交瘤技術製備抗TNF-α單抗,純化後,用間接ELISA法和微量細胞病變MTT法柃測抗體效價,ELISA相加試驗測定抗原錶位,硫氰痠銨洗脫法測定單抗的相對親和力指數,併進行類及亞類、細胞染色體覈型、特異性及穩定性檢測.結果 篩選齣7株分泌抗TNF單剋隆抗體的細胞株,其中6株具有較高的中和活性和良好的穩定性,其細胞上清及腹水的中和效價分彆為1:40～1:160和(1～3)×10-4 7株單抗均為IgG類IgG1亞類,輕鏈類型均為K,細胞覈型分析符閤雜交瘤細胞特徵,特異性良好,5H10株與其餘6株有不同的抗原錶位,相對親和力指數為0.4～1.5 mol/L.結論 已成功製備具有高中和活性的鼠抗TNF-α單剋隆抗體,為抗人TNF-α嵌閤抗體的構建奠定瞭基礎.
목적 제비고중화활성적서항종류배사인자-α(TNF-α)단극륭항체,병진행감정.방법 용중조TNF-α면역BALB/c소서,채용잡교류기술제비항TNF-α단항,순화후,용간접ELISA법화미량세포병변MTT법령측항체효개,ELISA상가시험측정항원표위,류청산안세탈법측정단항적상대친화력지수,병진행류급아류、세포염색체핵형、특이성급은정성검측.결과 사선출7주분비항TNF단극륭항체적세포주,기중6주구유교고적중화활성화량호적은정성,기세포상청급복수적중화효개분별위1:40～1:160화(1～3)×10-4 7주단항균위IgG류IgG1아류,경련류형균위K,세포핵형분석부합잡교류세포특정,특이성량호,5H10주여기여6주유불동적항원표위,상대친화력지수위0.4～1.5 mol/L.결론 이성공제비구유고중화활성적서항TNF-α단극륭항체,위항인TNF-α감합항체적구건전정료기출.
