中国兽医学报
中國獸醫學報
중국수의학보
CHINESE JOURNAL OF VETERINARY SCIENCE
2008年
12期
1449-1451,1460
,共4页
冯海华%邓旭明%赵丽红%宋斯伟%岳占碰%张国才
馮海華%鄧旭明%趙麗紅%宋斯偉%嶽佔踫%張國纔
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colX%基因克隆%原核表达%梅花鹿
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提取健康梅花鹿鹿茸肥大软骨细胞总RNA,以RT-PCR获得colX基因2 038 bp的完整编码序列,将其克隆入载体pMDl8-T中,经限制性内切酶和质粒PCR分析,并测序证实的阳性重组子与表达载体pET-28a(+)连接,转化大肠杆菌BL21(DE3).以IPTG诱导,经SDS-PAGE及Western-blot分析表明,获得相对分子质量为65 000的colX蛋白表达带,与预期相符,表明成功获得梅花鹿colX基因蛋白.
提取健康梅花鹿鹿茸肥大軟骨細胞總RNA,以RT-PCR穫得colX基因2 038 bp的完整編碼序列,將其剋隆入載體pMDl8-T中,經限製性內切酶和質粒PCR分析,併測序證實的暘性重組子與錶達載體pET-28a(+)連接,轉化大腸桿菌BL21(DE3).以IPTG誘導,經SDS-PAGE及Western-blot分析錶明,穫得相對分子質量為65 000的colX蛋白錶達帶,與預期相符,錶明成功穫得梅花鹿colX基因蛋白.
제취건강매화록록용비대연골세포총RNA,이RT-PCR획득colX기인2 038 bp적완정편마서렬,장기극륭입재체pMDl8-T중,경한제성내절매화질립PCR분석,병측서증실적양성중조자여표체재체pET-28a(+)련접,전화대장간균BL21(DE3).이IPTG유도,경SDS-PAGE급Western-blot분석표명,획득상대분자질량위65 000적colX단백표체대,여예기상부,표명성공획득매화록colX기인단백.
