CAJ | 학술논문

叠朊(Dpl)是朊蛋白(PrP)的横向同源物,两者的功能密切相关.本研究旨在制备能够特异检测重组表达的或者动物组织中Dpl的抗血清,以用于研究Dpl的功能及其与PrP的关系.根据已克隆的汉族人、中国黄牛、甘肃土种羊的Dpl基因,将其Dpl成熟蛋白编码区分别定向克隆到表达载体pET-30a(+)上,将重组表达载体转入E.coli BL21(DE3)pLysS,IPTG诱导表达.将表达并纯化的牛重组Dpl免疫4只青紫蓝兔,制备牛Dpl的抗血清,SDS-PAGE分析表明人、牛和羊的重组Dpl在E.coli中获得了高效表达.用Ni-NTA树脂亲和层析和胶洗脱法纯化了上述表达产物,ELISA和West-blot分析表明,制备的牛Dpl抗血清与重组人、牛和羊的Dpl以及牛和羊睾丸组织的Dpl发生了特异性反应,却不与重组人、牛和羊的PrP发生反应.上述结果表明制备的Dpl抗血清可以作为人、牛和羊Dpl的检测试剂和研究材料.
첩원(Dpl)시원단백(PrP)적횡향동원물,량자적공능밀절상관.본연구지재제비능구특이검측중조표체적혹자동물조직중Dpl적항혈청,이용우연구Dpl적공능급기여PrP적관계.근거이극륭적한족인、중국황우、감숙토충양적Dpl기인,장기Dpl성숙단백편마구분별정향극륭도표체재체pET-30a(+)상,장중조표체재체전입E.coli BL21(DE3)pLysS,IPTG유도표체.장표체병순화적우중조Dpl면역4지청자람토,제비우Dpl적항혈청,SDS-PAGE분석표명인、우화양적중조Dpl재E.coli중획득료고효표체.용Ni-NTA수지친화층석화효세탈법순화료상술표체산물,ELISA화West-blot분석표명,제비적우Dpl항혈청여중조인、우화양적Dpl이급우화양고환조직적Dpl발생료특이성반응,각불여중조인、우화양적PrP발생반응.상술결과표명제비적Dpl항혈청가이작위인、우화양Dpl적검측시제화연구재료.