分子植物育种
分子植物育種
분자식물육충
MOLECULAR PLANT BREEDING
2008年
3期
465-470
,共6页
人表皮生长因子%遗传转化%烟草%内质网滞留信号肽
人錶皮生長因子%遺傳轉化%煙草%內質網滯留信號肽
인표피생장인자%유전전화%연초%내질망체류신호태
将携带内质网滞留信号肽SEKDEL编码序列的重组人表皮生长因子基因(hEGF)克隆到植物表达载体中构建植物表达载体pSH-hEGFS,通过冻融法将pSH-hEGFS转化到根癌农杆菌LBA4404中,以烟草无菌苗叶盘为外植体,通过农杆菌介导法进行遗传转化,经抗生素抗性筛选获得抗性植株,通过GUS组织化学染色分析、PCR检测以及RT-PCR分析,证明重组人表皮生长因子基因已整合到烟草基因组中并已表达,间接法ELISA检测结果表明转基因烟草中重组人表皮生长因子表达量最高达叶片总可溶蛋白的0.003%.
將攜帶內質網滯留信號肽SEKDEL編碼序列的重組人錶皮生長因子基因(hEGF)剋隆到植物錶達載體中構建植物錶達載體pSH-hEGFS,通過凍融法將pSH-hEGFS轉化到根癌農桿菌LBA4404中,以煙草無菌苗葉盤為外植體,通過農桿菌介導法進行遺傳轉化,經抗生素抗性篩選穫得抗性植株,通過GUS組織化學染色分析、PCR檢測以及RT-PCR分析,證明重組人錶皮生長因子基因已整閤到煙草基因組中併已錶達,間接法ELISA檢測結果錶明轉基因煙草中重組人錶皮生長因子錶達量最高達葉片總可溶蛋白的0.003%.
장휴대내질망체류신호태SEKDEL편마서렬적중조인표피생장인자기인(hEGF)극륭도식물표체재체중구건식물표체재체pSH-hEGFS,통과동융법장pSH-hEGFS전화도근암농간균LBA4404중,이연초무균묘협반위외식체,통과농간균개도법진행유전전화,경항생소항성사선획득항성식주,통과GUS조직화학염색분석、PCR검측이급RT-PCR분석,증명중조인표피생장인자기인이정합도연초기인조중병이표체,간접법ELISA검측결과표명전기인연초중중조인표피생장인자표체량최고체협편총가용단백적0.003%.
