CAJ | 학술논문

目的:研究实验性左侧精索静脉曲张(ELV)对青春期大鼠睾丸和附睾中精子结合抗原11(SPAG11)mRNA及其蛋白异构体SPAG11E表达的影响,并探讨其与精索静脉曲张导致男性不育的关系.方法:40只SD大鼠随机分为ELV 2周组、4周组,假手术对照2周组、4周组,每组10只.ELV组行部分结扎左肾静脉建立青春期SD大鼠ELV模型,假手术对照组仅显露左肾静脉过程,但不结扎.应用RT-PCR和免疫组化法(n＝5)检测SPAG11 mRNA及SPAG11E蛋白在ELV2周组和ELV4周组及各自对照组大鼠双侧睾丸、附睾中的表达变化.结果:RT-PCR结果显示,SPAG11基因376 bp的特异扩增产物仅见于大鼠附睾组织中.免疫组化结果显示,SPAG11E蛋白主要与睾丸生精上皮的圆形和长形精子细胞的顶体泡和顶体、睾丸问质细胞的胞质相结合;在附睾管上皮主细胞胞质和顶部静纤毛中表达.对RT-PCR的相对吸光度值和免疫组化的灰度值进行统计学分析显示:①左侧附睾ELV2周和4周组SPAG11 mRNA和SPAG11E蛋白的表达与各自右侧组及各自对照组比较均有显著减弱(P＜0.05或P＜0.01);左侧附睾ELV 4周组SPAG11 mRNA与SPAG11E的表达较ELV2周组显著减少(P＜0.05或P＜0.01);右侧附睾ELV4周组SPAG11E的表达也较ELV2周组显著减少(P＜0.01);②两实验组双侧睾丸SPAG11E蛋白的表达与相应对照组比较均未见明显差异(P＞0.05),且在ELV2周组和ELV4周组之间该蛋白的表达也无显著性差异(P＞0.05).结论:SPAG11是特异表达于附睾的基因,在大鼠睾丸和附睾中均可见其蛋白异构体SPAG11E免疫阳性反应,其定位及表达水平具有细胞特异性和区域特异性,而且SPAG11 mRNA及SPAG11E蛋白在ELV模型鼠附睾中的表达发生了明显变化,这提示SPAG11不仅可能在大鼠精子发生、成熟过程中发挥重要作用,还可能与精索静脉曲张所致的男性小育相关.
목적:연구실험성좌측정색정맥곡장(ELV)대청춘기대서고환화부고중정자결합항원11(SPAG11)mRNA급기단백이구체SPAG11E표체적영향,병탐토기여정색정맥곡장도치남성불육적관계.방법:40지SD대서수궤분위ELV 2주조、4주조,가수술대조2주조、4주조,매조10지.ELV조행부분결찰좌신정맥건립청춘기SD대서ELV모형,가수술대조조부현로좌신정맥과정,단불결찰.응용RT-PCR화면역조화법(n＝5)검측SPAG11 mRNA급SPAG11E단백재ELV2주조화ELV4주조급각자대조조대서쌍측고환、부고중적표체변화.결과:RT-PCR결과현시,SPAG11기인376 bp적특이확증산물부견우대서부고조직중.면역조화결과현시,SPAG11E단백주요여고환생정상피적원형화장형정자세포적정체포화정체、고환문질세포적포질상결합;재부고관상피주세포포질화정부정섬모중표체.대RT-PCR적상대흡광도치화면역조화적회도치진행통계학분석현시:①좌측부고ELV2주화4주조SPAG11 mRNA화SPAG11E단백적표체여각자우측조급각자대조조비교균유현저감약(P＜0.05혹P＜0.01);좌측부고ELV 4주조SPAG11 mRNA여SPAG11E적표체교ELV2주조현저감소(P＜0.05혹P＜0.01);우측부고ELV4주조SPAG11E적표체야교ELV2주조현저감소(P＜0.01);②량실험조쌍측고환SPAG11E단백적표체여상응대조조비교균미견명현차이(P＞0.05),차재ELV2주조화ELV4주조지간해단백적표체야무현저성차이(P＞0.05).결론:SPAG11시특이표체우부고적기인,재대서고환화부고중균가견기단백이구체SPAG11E면역양성반응,기정위급표체수평구유세포특이성화구역특이성,이차SPAG11 mRNA급SPAG11E단백재ELV모형서부고중적표체발생료명현변화,저제시SPAG11불부가능재대서정자발생、성숙과정중발휘중요작용,환가능여정색정맥곡장소치적남성소육상관.