细胞与分子免疫学杂志
細胞與分子免疫學雜誌
세포여분자면역학잡지
2008年
12期
1170-1173
,共4页
赵晓瑜%毕智丽%吴亦红%辛海涛
趙曉瑜%畢智麗%吳亦紅%辛海濤
조효유%필지려%오역홍%신해도
Jo-1%基因%表达%抗原特异性
Jo-1%基因%錶達%抗原特異性
Jo-1%기인%표체%항원특이성
目的:旨在获得高纯人Jo-1抗原(即组氨酰-tRNA合成酶).方法:利用RT-PCR从人胎盘总RNA中获得Jo-1的编码基因,并分别用IMPACT-CN和pMAL系统的pTYB11、 pMAL-c质粒,构建了表达载体,转化至大肠杆菌ER2566、 BL21.结果:经筛选与鉴定,得到阳性重组子诱导表达后均获得Jo-1融合蛋白.Western blot显示,这两种融合蛋白都具有Jo-1抗原特异性,即仅与含Jo-1抗体的多肌炎和皮肌炎自身免疫病患者血清反应,而与正常人以及188例含有其他自身抗体(分别为RNP阳性、 Sm阳性、 Ro/La阳性和RNP/Ro阳性)的患者血清均为阴性反应.结论:在两种表达载体中,pMAL-c-Jo-1的表达量超过菌体蛋白的50%,而且以可溶性形式存在,有利于分离纯化,为临床检测创造了条件.
目的:旨在穫得高純人Jo-1抗原(即組氨酰-tRNA閤成酶).方法:利用RT-PCR從人胎盤總RNA中穫得Jo-1的編碼基因,併分彆用IMPACT-CN和pMAL繫統的pTYB11、 pMAL-c質粒,構建瞭錶達載體,轉化至大腸桿菌ER2566、 BL21.結果:經篩選與鑒定,得到暘性重組子誘導錶達後均穫得Jo-1融閤蛋白.Western blot顯示,這兩種融閤蛋白都具有Jo-1抗原特異性,即僅與含Jo-1抗體的多肌炎和皮肌炎自身免疫病患者血清反應,而與正常人以及188例含有其他自身抗體(分彆為RNP暘性、 Sm暘性、 Ro/La暘性和RNP/Ro暘性)的患者血清均為陰性反應.結論:在兩種錶達載體中,pMAL-c-Jo-1的錶達量超過菌體蛋白的50%,而且以可溶性形式存在,有利于分離純化,為臨床檢測創造瞭條件.
목적:지재획득고순인Jo-1항원(즉조안선-tRNA합성매).방법:이용RT-PCR종인태반총RNA중획득Jo-1적편마기인,병분별용IMPACT-CN화pMAL계통적pTYB11、 pMAL-c질립,구건료표체재체,전화지대장간균ER2566、 BL21.결과:경사선여감정,득도양성중조자유도표체후균획득Jo-1융합단백.Western blot현시,저량충융합단백도구유Jo-1항원특이성,즉부여함Jo-1항체적다기염화피기염자신면역병환자혈청반응,이여정상인이급188례함유기타자신항체(분별위RNP양성、 Sm양성、 Ro/La양성화RNP/Ro양성)적환자혈청균위음성반응.결론:재량충표체재체중,pMAL-c-Jo-1적표체량초과균체단백적50%,이차이가용성형식존재,유리우분리순화,위림상검측창조료조건.
