CAJ | 학술논문

本研究应用限制性内切酶Mbo Ⅰ消化胸膜肺炎放线杆菌血清7型的基因组DNA,回收500 bp～3 000 bp的片段,插入到真核表达载体pCDNA3.1(+)的BamH Ⅰ酶切位点构建重组质粒,电转化大肠杆菌TG1,获得胸膜肺炎放线杆菌的基因组表达文库(大约含有106个克隆).将该文库随机分为10个亚文库(10个Clone pool),分别提取每个亚文库的重组质粒免疫小鼠(n=130只),免疫剂量为100 μg,免疫3次后以1型胸膜肺炎放线杆菌进行攻毒,通过相对保护率、肺组织荷菌数、病理组织学3个指标测定其对小鼠的免疫保护作用.试验结果表明,Clone pool3、C1one pool2、Clone pool6和Clone pool7的免疫效果明显优于其他免疫组,尤其是Clone pool3的免疫保护效果最佳.本研究成功构建了7型胸膜肺炎放线杆菌的基因组表达文库,从而为筛选和获得新的保护性抗原基因奠定基础.
본연구응용한제성내절매Mbo Ⅰ소화흉막폐염방선간균혈청7형적기인조DNA,회수500 bp～3 000 bp적편단,삽입도진핵표체재체pCDNA3.1(+)적BamH Ⅰ매절위점구건중조질립,전전화대장간균TG1,획득흉막폐염방선간균적기인조표체문고(대약함유106개극륭).장해문고수궤분위10개아문고(10개Clone pool),분별제취매개아문고적중조질립면역소서(n=130지),면역제량위100 μg,면역3차후이1형흉막폐염방선간균진행공독,통과상대보호솔、폐조직하균수、병리조직학3개지표측정기대소서적면역보호작용.시험결과표명,Clone pool3、C1one pool2、Clone pool6화Clone pool7적면역효과명현우우기타면역조,우기시Clone pool3적면역보호효과최가.본연구성공구건료7형흉막폐염방선간균적기인조표체문고,종이위사선화획득신적보호성항원기인전정기출.