人干燥综合征A抗原重组体的构建及鉴定
인간조종합정A항원중조체적구건급감정
Construction and Identification of Recombinant Expressing of Human Sjogren's Syndrome Antigen A
  • 万方数据
    医学研究杂志 의학연구잡지
    JOURNAL OF MEDICAL RESEARCH
    2008年 2期 47-49 ,共3页

    李倩%高扬%倪安平%于孟学%朱立平%刘音%李永哲%林嘉友%甘晓丹

    리천%고양%예안평%우맹학%주립평%류음%리영철%림가우%감효단

    人干燥综合征A抗原%cDNA克隆%重组体 人榦燥綜閤徵A抗原%cDNA剋隆%重組體
    인간조종합정A항원%cDNA극륭%중조체
    目的 克隆人干燥综合征A抗原基因(SSA-52kD),为SSA抗原的表达和使用重组抗原用于自身抗体的临床检测奠定基础.方法 根据GenBank中检索到的人SSA-52kD cDNA序列,在5'非编码区和3'非编码区设计特异性引物,提取人源Hela细胞总RNA作为模板,反转录RT-PCR扩增人干燥综合征SSA-52kD抗原cDNA.PCR产物纯化后连接至载体PET30a,导人大肠杆菌DH5α,构建重组质粒PET-30a-SSA-52kD.对重组质粒进行酶切鉴定,选择阳性克隆测序;对DNA测序结果进行鉴定分析.结果 RT-PCR扩增产物为1447bp.重组质粒PET-30a-SSA-52kD经Bgl Ⅱ和HindⅢ双酶切证实含目的基因片段.序列分析提示与GenBank中检索到的一致.结论 成功克隆人SSA-52kD基因,并构建重组质粒PET-30a-SSA-52kD.
    목적 극륭인간조종합정A항원기인(SSA-52kD),위SSA항원적표체화사용중조항원용우자신항체적림상검측전정기출.방법 근거GenBank중검색도적인SSA-52kD cDNA서렬,재5'비편마구화3'비편마구설계특이성인물,제취인원Hela세포총RNA작위모판,반전록RT-PCR확증인간조종합정SSA-52kD항원cDNA.PCR산물순화후련접지재체PET30a,도인대장간균DH5α,구건중조질립PET-30a-SSA-52kD.대중조질립진행매절감정,선택양성극륭측서;대DNA측서결과진행감정분석.결과 RT-PCR확증산물위1447bp.중조질립PET-30a-SSA-52kD경Bgl Ⅱ화HindⅢ쌍매절증실함목적기인편단.서렬분석제시여GenBank중검색도적일치.결론 성공극륭인SSA-52kD기인,병구건중조질립PET-30a-SSA-52kD.
    원문보기 원문다운로드 사이트로이동
저자의 최근 논문