河北师范大学学报（自然科学版）
河北師範大學學報（自然科學版）
하북사범대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF HEBEI NORMAL UNIVERSITY(NATURAL SCIENCE)
2008年
1期
94-97,108
,共5页
罗惠霞%李敏%王玉炯%李稷亮
囉惠霞%李敏%王玉炯%李稷亮
라혜하%리민%왕옥형%리직량
组织型纤溶酶原激活剂%rPA(K)%原核表达
組織型纖溶酶原激活劑%rPA(K)%原覈錶達
조직형섬용매원격활제%rPA(K)%원핵표체
利用PCR技术,获得了rPA(K)cDNA片段,将其克隆至pET-30a(+),成功构建了新型的rPA(K)原核载体pLrA(K),并实现了其在大肠杆菌中的初步表达,经IPTG(终浓度为1 mmol/L)分别于37℃诱导1,2,3 h后,以Bio-Rad凝胶成像仪分析目的蛋白,相对含量分别是19%,15.8%和24.3%,平均密度分别是0.13,0.14和0.16,IPTG诱导3 h后蛋白表达量最高.ELISA结果显示表达产物与抗t-PA抗体呈现特异性阳性反应,进一步参考标准曲线得出样品中rPA(K)的平均含量为210 μg/L.
利用PCR技術,穫得瞭rPA(K)cDNA片段,將其剋隆至pET-30a(+),成功構建瞭新型的rPA(K)原覈載體pLrA(K),併實現瞭其在大腸桿菌中的初步錶達,經IPTG(終濃度為1 mmol/L)分彆于37℃誘導1,2,3 h後,以Bio-Rad凝膠成像儀分析目的蛋白,相對含量分彆是19%,15.8%和24.3%,平均密度分彆是0.13,0.14和0.16,IPTG誘導3 h後蛋白錶達量最高.ELISA結果顯示錶達產物與抗t-PA抗體呈現特異性暘性反應,進一步參攷標準麯線得齣樣品中rPA(K)的平均含量為210 μg/L.
이용PCR기술,획득료rPA(K)cDNA편단,장기극륭지pET-30a(+),성공구건료신형적rPA(K)원핵재체pLrA(K),병실현료기재대장간균중적초보표체,경IPTG(종농도위1 mmol/L)분별우37℃유도1,2,3 h후,이Bio-Rad응효성상의분석목적단백,상대함량분별시19%,15.8%화24.3%,평균밀도분별시0.13,0.14화0.16,IPTG유도3 h후단백표체량최고.ELISA결과현시표체산물여항t-PA항체정현특이성양성반응,진일보삼고표준곡선득출양품중rPA(K)적평균함량위210 μg/L.
