新疆大学学报（自然科学版）
新疆大學學報（自然科學版）
신강대학학보（자연과학판）
XINJIANG UNIVERSITY JOURNAL(NATURAL SCIENCE EDITION)
2007年
4期
449-453
,共5页
窦君%王娉%周勇%尼格买提·热西旦%张富春
竇君%王娉%週勇%尼格買提·熱西旦%張富春
두군%왕빙%주용%니격매제·열서단%장부춘
新疆家蚕抗菌肽%真核表达%抗肿瘤活性%胃癌细胞MGC80-3
新疆傢蠶抗菌肽%真覈錶達%抗腫瘤活性%胃癌細胞MGC80-3
신강가잠항균태%진핵표체%항종류활성%위암세포MGC80-3
目的 构建新疆家蚕抗菌肽(cecropin-XJ)基因的真核表达载体pEGFP-C1/cecropin-XJ(pEGFP-cec),检测其在肿瘤细胞中的表达情况,探讨抗菌肽对肿瘤细胞的作用机制和抗菌肽抑瘤作用效果.方法 应用基因重组技术,将新疆家蚕抗菌肽(cecropin-XJ)基因克隆到真核表达载体pEGFP-C1,通过酶切和测序的方法鉴定重组质粒pEGFP-cec的正确性.将pEGFP-cec经脂质体法转染到胃癌细胞MGc80-3,48 h后观察EGFP瞬时表达情况;72 h后,应用RT-PCR,检测抗菌肽cecropin-XJ基因的表达;96 h后,消化细胞,经台盼蓝染色,检测重组质粒pEGFP-cec表达产物对肿瘤细胞的影响.结果 细胞转染48 h后,荧光显微镜下可观察到EGFP的表达,发出绿色荧光;转染72 h后,RT-PCR检测到胞内有抗菌肽cecropin-XJ基因的表达;表达产物能够抑制肿瘤细胞的生长.结论 成功构建了真核表达载体pEGFP-cec,并在肿瘤细胞中可见抗菌肽cecropin-XJ和EGFP基因的有效表达以及表达产物具有显著的抗肿瘤活性.为深入开展抗菌肽抑制肿瘤的研究奠定基础.
目的 構建新疆傢蠶抗菌肽(cecropin-XJ)基因的真覈錶達載體pEGFP-C1/cecropin-XJ(pEGFP-cec),檢測其在腫瘤細胞中的錶達情況,探討抗菌肽對腫瘤細胞的作用機製和抗菌肽抑瘤作用效果.方法 應用基因重組技術,將新疆傢蠶抗菌肽(cecropin-XJ)基因剋隆到真覈錶達載體pEGFP-C1,通過酶切和測序的方法鑒定重組質粒pEGFP-cec的正確性.將pEGFP-cec經脂質體法轉染到胃癌細胞MGc80-3,48 h後觀察EGFP瞬時錶達情況;72 h後,應用RT-PCR,檢測抗菌肽cecropin-XJ基因的錶達;96 h後,消化細胞,經檯盼藍染色,檢測重組質粒pEGFP-cec錶達產物對腫瘤細胞的影響.結果 細胞轉染48 h後,熒光顯微鏡下可觀察到EGFP的錶達,髮齣綠色熒光;轉染72 h後,RT-PCR檢測到胞內有抗菌肽cecropin-XJ基因的錶達;錶達產物能夠抑製腫瘤細胞的生長.結論 成功構建瞭真覈錶達載體pEGFP-cec,併在腫瘤細胞中可見抗菌肽cecropin-XJ和EGFP基因的有效錶達以及錶達產物具有顯著的抗腫瘤活性.為深入開展抗菌肽抑製腫瘤的研究奠定基礎.
목적 구건신강가잠항균태(cecropin-XJ)기인적진핵표체재체pEGFP-C1/cecropin-XJ(pEGFP-cec),검측기재종류세포중적표체정황,탐토항균태대종류세포적작용궤제화항균태억류작용효과.방법 응용기인중조기술,장신강가잠항균태(cecropin-XJ)기인극륭도진핵표체재체pEGFP-C1,통과매절화측서적방법감정중조질립pEGFP-cec적정학성.장pEGFP-cec경지질체법전염도위암세포MGc80-3,48 h후관찰EGFP순시표체정황;72 h후,응용RT-PCR,검측항균태cecropin-XJ기인적표체;96 h후,소화세포,경태반람염색,검측중조질립pEGFP-cec표체산물대종류세포적영향.결과 세포전염48 h후,형광현미경하가관찰도EGFP적표체,발출록색형광;전염72 h후,RT-PCR검측도포내유항균태cecropin-XJ기인적표체;표체산물능구억제종류세포적생장.결론 성공구건료진핵표체재체pEGFP-cec,병재종류세포중가견항균태cecropin-XJ화EGFP기인적유효표체이급표체산물구유현저적항종류활성.위심입개전항균태억제종류적연구전정기출.
