中国生物化学与分子生物学报
中國生物化學與分子生物學報
중국생물화학여분자생물학보
CHINESE JOURNAL OF BIOCHEMISTRY AND MOLECULAR BIOLOGY
2007年
10期
859-863
,共5页
t-PA%β2糖蛋白Ⅰ%纤溶活性%ELISA
t-PA%β2糖蛋白Ⅰ%纖溶活性%ELISA
t-PA%β2당단백Ⅰ%섬용활성%ELISA
利用重组DNA技术和原核表达,得到了人体组织型纤溶酶原激活剂t-PA的缺失型突变体r-PA和Kringle2功能区,并在变性条件下通过金属螯合层析纯化得到纯度较高的r-PA和Kringle2重组蛋白.用纤维蛋白活性平板检测到复性的r-PA和Kringle2都具有体外纤溶活性,并且β2糖蛋白Ⅰ(β2-glycoprotein Ⅰ,β2GPⅠ)对r-PA的体外纤溶活性有显著的促进作用:在β2GPⅠ浓度为1μmol/L和4μmol/L时,r-PA的纤溶活性分别提高1.8和2.1倍.ELISA方法检测发现,β2GPⅠ与r-PA,Kringle2均有特异性结合,并且随着β2GPⅠ浓度的增加,它与包被在酶标板上的重组蛋白r-PA和Kingle2的结合都有趋于饱和的趋势,但其饱和浓度却均远高于β2GPⅠ与t-PA结合的饱和浓度.
利用重組DNA技術和原覈錶達,得到瞭人體組織型纖溶酶原激活劑t-PA的缺失型突變體r-PA和Kringle2功能區,併在變性條件下通過金屬螯閤層析純化得到純度較高的r-PA和Kringle2重組蛋白.用纖維蛋白活性平闆檢測到複性的r-PA和Kringle2都具有體外纖溶活性,併且β2糖蛋白Ⅰ(β2-glycoprotein Ⅰ,β2GPⅠ)對r-PA的體外纖溶活性有顯著的促進作用:在β2GPⅠ濃度為1μmol/L和4μmol/L時,r-PA的纖溶活性分彆提高1.8和2.1倍.ELISA方法檢測髮現,β2GPⅠ與r-PA,Kringle2均有特異性結閤,併且隨著β2GPⅠ濃度的增加,它與包被在酶標闆上的重組蛋白r-PA和Kingle2的結閤都有趨于飽和的趨勢,但其飽和濃度卻均遠高于β2GPⅠ與t-PA結閤的飽和濃度.
이용중조DNA기술화원핵표체,득도료인체조직형섬용매원격활제t-PA적결실형돌변체r-PA화Kringle2공능구,병재변성조건하통과금속오합층석순화득도순도교고적r-PA화Kringle2중조단백.용섬유단백활성평판검측도복성적r-PA화Kringle2도구유체외섬용활성,병차β2당단백Ⅰ(β2-glycoprotein Ⅰ,β2GPⅠ)대r-PA적체외섬용활성유현저적촉진작용:재β2GPⅠ농도위1μmol/L화4μmol/L시,r-PA적섬용활성분별제고1.8화2.1배.ELISA방법검측발현,β2GPⅠ여r-PA,Kringle2균유특이성결합,병차수착β2GPⅠ농도적증가,타여포피재매표판상적중조단백r-PA화Kingle2적결합도유추우포화적추세,단기포화농도각균원고우β2GPⅠ여t-PA결합적포화농도.
