环境与健康杂志
環境與健康雜誌
배경여건강잡지
JOURNAL OF ENVIRONMENT AND HEALTH
2007年
7期
501-504
,共4页
王雨%张庆惠%孙文娟%喻道军
王雨%張慶惠%孫文娟%喻道軍
왕우%장경혜%손문연%유도군
镉%RNA干扰%Caspase-3基因%凋亡
鎘%RNA榦擾%Caspase-3基因%凋亡
력%RNA간우%Caspase-3기인%조망
目的 研究RNA干扰Caspase-3基因对镉致转化人胚肾293细胞凋亡的影响,探讨Caspase-3基因在镉致细胞凋亡中的作用.方法 选择转化人胚肾293细胞进行体外培养,以小干扰RNA(small interference RNA,siRNA)处理细胞36 h后,再以40 μmol/L氯化镉分别处理12～24 h,以四甲基偶氮唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法检测细胞活力,以逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western-blot法分别检测Caspase-3基因表达水平和蛋白表达水平,以流式细胞仪Annexin-V-PI双染法检测细胞凋亡率.结果 40μmol/L氯化镉处理转化人胚肾293细胞12 h后,Caspase-3基因mRNA水平显著增高,相对分子质量为20 kDa的活性亚单位条带显著增强;24 h后,细胞凋亡率显著增加(n=4,P＜0.01),RNA干扰显著抑制镉诱导的细胞Caspase-3基因mRNA和相对分子质量为20 kDa的蛋白表达水平,使细胞凋亡率显著降低(n=4,P＜0.01).结论 体外实验表明,RNA干扰Caspase-3基因对镉诱导转化人胚肾293细胞凋亡具有明显的抑制作用,Caspase-3基因在镉诱导转化人胚肾293细胞凋亡过程中起着重要的作用.
目的 研究RNA榦擾Caspase-3基因對鎘緻轉化人胚腎293細胞凋亡的影響,探討Caspase-3基因在鎘緻細胞凋亡中的作用.方法 選擇轉化人胚腎293細胞進行體外培養,以小榦擾RNA(small interference RNA,siRNA)處理細胞36 h後,再以40 μmol/L氯化鎘分彆處理12～24 h,以四甲基偶氮唑藍(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法檢測細胞活力,以逆轉錄聚閤酶鏈反應(RT-PCR)和Western-blot法分彆檢測Caspase-3基因錶達水平和蛋白錶達水平,以流式細胞儀Annexin-V-PI雙染法檢測細胞凋亡率.結果 40μmol/L氯化鎘處理轉化人胚腎293細胞12 h後,Caspase-3基因mRNA水平顯著增高,相對分子質量為20 kDa的活性亞單位條帶顯著增彊;24 h後,細胞凋亡率顯著增加(n=4,P＜0.01),RNA榦擾顯著抑製鎘誘導的細胞Caspase-3基因mRNA和相對分子質量為20 kDa的蛋白錶達水平,使細胞凋亡率顯著降低(n=4,P＜0.01).結論 體外實驗錶明,RNA榦擾Caspase-3基因對鎘誘導轉化人胚腎293細胞凋亡具有明顯的抑製作用,Caspase-3基因在鎘誘導轉化人胚腎293細胞凋亡過程中起著重要的作用.
목적 연구RNA간우Caspase-3기인대력치전화인배신293세포조망적영향,탐토Caspase-3기인재력치세포조망중적작용.방법 선택전화인배신293세포진행체외배양,이소간우RNA(small interference RNA,siRNA)처리세포36 h후,재이40 μmol/L록화력분별처리12～24 h,이사갑기우담서람(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)법검측세포활력,이역전록취합매련반응(RT-PCR)화Western-blot법분별검측Caspase-3기인표체수평화단백표체수평,이류식세포의Annexin-V-PI쌍염법검측세포조망솔.결과 40μmol/L록화력처리전화인배신293세포12 h후,Caspase-3기인mRNA수평현저증고,상대분자질량위20 kDa적활성아단위조대현저증강;24 h후,세포조망솔현저증가(n=4,P＜0.01),RNA간우현저억제력유도적세포Caspase-3기인mRNA화상대분자질량위20 kDa적단백표체수평,사세포조망솔현저강저(n=4,P＜0.01).결론 체외실험표명,RNA간우Caspase-3기인대력유도전화인배신293세포조망구유명현적억제작용,Caspase-3기인재력유도전화인배신293세포조망과정중기착중요적작용.
