CAJ | 학술논문

目的:利用前列腺特异性抗原(prostate-specific antigen,PSA)组织特异性表达的特点,克隆出其上游增强子(prostate-specific antigen enhancer,PSAE)和启动子(prostate-specific antigen promoter,PSAP)片断,并对其表达效率和组织特异性表达进行初步研究.方法:从前列腺癌组织提取基因组DNA,并采用PCR方法分别扩增PSA增强子和启动子序列;利用报告基因pEGFP-1,分别构建含不同调控序列的表达载体;脂质体介导基因转染不同细胞并观察绿色荧光蛋白(GFP)的表达情况.结果:成功构建质粒pPSAE-EGFP、pPSAP-EGFP和pPSAE-PSAP-EGFP;转染结果显示,pPSAE-PSAP-EGFP在前列腺癌细胞PC-3中的荧光强度明显高于pPSAP-EGFP,pPSAE-EGFP同样观察到荧光表达,说明PSA增强子能显著提高PSA启动子的转录能力,并具有单独调控基因表达的能力.结论:PSA增强子和启动子的共同调控可以提高基因表达的有效性和细胞特异性,为前列腺癌的临床基因治疗提供实验依据.
목적:이용전렬선특이성항원(prostate-specific antigen,PSA)조직특이성표체적특점,극륭출기상유증강자(prostate-specific antigen enhancer,PSAE)화계동자(prostate-specific antigen promoter,PSAP)편단,병대기표체효솔화조직특이성표체진행초보연구.방법:종전렬선암조직제취기인조DNA,병채용PCR방법분별확증PSA증강자화계동자서렬;이용보고기인pEGFP-1,분별구건함불동조공서렬적표체재체;지질체개도기인전염불동세포병관찰록색형광단백(GFP)적표체정황.결과:성공구건질립pPSAE-EGFP、pPSAP-EGFP화pPSAE-PSAP-EGFP;전염결과현시,pPSAE-PSAP-EGFP재전렬선암세포PC-3중적형광강도명현고우pPSAP-EGFP,pPSAE-EGFP동양관찰도형광표체,설명PSA증강자능현저제고PSA계동자적전록능력,병구유단독조공기인표체적능력.결론:PSA증강자화계동자적공동조공가이제고기인표체적유효성화세포특이성,위전렬선암적림상기인치료제공실험의거.