中国肿瘤生物治疗杂志
中國腫瘤生物治療雜誌
중국종류생물치료잡지
CHINESE JOURNAL OF CANCER BIOTHERAPY
2007年
4期
352-356
,共5页
张立智%蔡宣松%钱志康%梅炯%黄煌渊%黄伟达
張立智%蔡宣鬆%錢誌康%梅炯%黃煌淵%黃偉達
장립지%채선송%전지강%매형%황황연%황위체
血管内皮生长因子%小干扰RNA%骨肉瘤细胞%仿血管发生%凋亡%增殖
血管內皮生長因子%小榦擾RNA%骨肉瘤細胞%倣血管髮生%凋亡%增殖
혈관내피생장인자%소간우RNA%골육류세포%방혈관발생%조망%증식
目的: 探讨VEGF特异siRNA在骨肉瘤细胞株(MG63)增殖、凋亡以及仿血管发生中的作用.方法: 以pSiliencer载体构建VEGF特异siRNA质粒pSilencer-VEGF siRNA,并转染骨肉瘤细胞MG63;将细胞分为pSilencer-VEGF siRNA质粒组(试验组)和空siRNA质粒组(对照组),Western blotting在蛋白水平检测转染重组质粒后MG63细胞VEGF表达情况;MTT比色法、光镜、流式细胞仪结合 Annexin V-FITC/PI染色和H-E染色观察质粒转染后骨肉瘤细胞增殖、凋亡和仿血管发生情况.结果: 测序证实成功构建了针对VEGF的siRNA重组质粒.转染pSilencer-VEGF siRNA重组质粒后的试验组培养液中及骨肉瘤细胞内VEGF蛋白表达下降;转染后48、72 、96 h骨肉瘤细胞的增殖抑制率分别为41.67%、43.92%、35.32%,并发生了早期凋亡,凋亡率为28.27%.转染pSilencer-VEGF siRNA重组质粒的骨肉瘤细胞未见仿血管发生,转染空质粒的对照组骨肉瘤细胞则有仿血管发生.结论 :RNA干扰VEGF基因能抑制骨肉瘤细胞增殖,促进骨肉瘤细胞早期凋亡,干扰骨肉瘤细胞仿血管发生,为临床基因治疗骨肉瘤提供了新的思路.
目的: 探討VEGF特異siRNA在骨肉瘤細胞株(MG63)增殖、凋亡以及倣血管髮生中的作用.方法: 以pSiliencer載體構建VEGF特異siRNA質粒pSilencer-VEGF siRNA,併轉染骨肉瘤細胞MG63;將細胞分為pSilencer-VEGF siRNA質粒組(試驗組)和空siRNA質粒組(對照組),Western blotting在蛋白水平檢測轉染重組質粒後MG63細胞VEGF錶達情況;MTT比色法、光鏡、流式細胞儀結閤 Annexin V-FITC/PI染色和H-E染色觀察質粒轉染後骨肉瘤細胞增殖、凋亡和倣血管髮生情況.結果: 測序證實成功構建瞭針對VEGF的siRNA重組質粒.轉染pSilencer-VEGF siRNA重組質粒後的試驗組培養液中及骨肉瘤細胞內VEGF蛋白錶達下降;轉染後48、72 、96 h骨肉瘤細胞的增殖抑製率分彆為41.67%、43.92%、35.32%,併髮生瞭早期凋亡,凋亡率為28.27%.轉染pSilencer-VEGF siRNA重組質粒的骨肉瘤細胞未見倣血管髮生,轉染空質粒的對照組骨肉瘤細胞則有倣血管髮生.結論 :RNA榦擾VEGF基因能抑製骨肉瘤細胞增殖,促進骨肉瘤細胞早期凋亡,榦擾骨肉瘤細胞倣血管髮生,為臨床基因治療骨肉瘤提供瞭新的思路.
목적: 탐토VEGF특이siRNA재골육류세포주(MG63)증식、조망이급방혈관발생중적작용.방법: 이pSiliencer재체구건VEGF특이siRNA질립pSilencer-VEGF siRNA,병전염골육류세포MG63;장세포분위pSilencer-VEGF siRNA질립조(시험조)화공siRNA질립조(대조조),Western blotting재단백수평검측전염중조질립후MG63세포VEGF표체정황;MTT비색법、광경、류식세포의결합 Annexin V-FITC/PI염색화H-E염색관찰질립전염후골육류세포증식、조망화방혈관발생정황.결과: 측서증실성공구건료침대VEGF적siRNA중조질립.전염pSilencer-VEGF siRNA중조질립후적시험조배양액중급골육류세포내VEGF단백표체하강;전염후48、72 、96 h골육류세포적증식억제솔분별위41.67%、43.92%、35.32%,병발생료조기조망,조망솔위28.27%.전염pSilencer-VEGF siRNA중조질립적골육류세포미견방혈관발생,전염공질립적대조조골육류세포칙유방혈관발생.결론 :RNA간우VEGF기인능억제골육류세포증식,촉진골육류세포조기조망,간우골육류세포방혈관발생,위림상기인치료골육류제공료신적사로.
