中国生物工程杂志
中國生物工程雜誌
중국생물공정잡지
JOURNAL OF CHINESE BIOTECHNOLOGY
2006年
3期
31-36
,共6页
张守涛%周雁胜%赖学华%包星峰%郭蔼光
張守濤%週雁勝%賴學華%包星峰%郭藹光
장수도%주안성%뢰학화%포성봉%곽애광
蛇毒纤溶酶%分子伴侣%可溶性表达%纯化
蛇毒纖溶酶%分子伴侶%可溶性錶達%純化
사독섬용매%분자반려%가용성표체%순화
Alfimeprase是Fibrolase的突变体,是一种蛇毒纤溶酶,有纤溶活性而无出血性.根据Alfimeprase的氨基酸序列和大肠杆菌密码子偏爱性,利用PCR的方法合成Alfimeprase DNA序列,分别融合在NusA和MBP的C端,与分子伴侣FkpA在大肠杆菌Origami B(DE3)中共表达,融合蛋白NusA/Alfimeprase以部分可溶的形式存在,可溶部分占上清总蛋白的25%左右,通过镍柱亲合层析纯化和肠激酶切割得到具有纤溶活性的重组蛋白Alfimeprase.首次报道在大肠杆菌中可溶表达Alfimeprase,为以后深入研究其功能及应用奠定了基础.
Alfimeprase是Fibrolase的突變體,是一種蛇毒纖溶酶,有纖溶活性而無齣血性.根據Alfimeprase的氨基痠序列和大腸桿菌密碼子偏愛性,利用PCR的方法閤成Alfimeprase DNA序列,分彆融閤在NusA和MBP的C耑,與分子伴侶FkpA在大腸桿菌Origami B(DE3)中共錶達,融閤蛋白NusA/Alfimeprase以部分可溶的形式存在,可溶部分佔上清總蛋白的25%左右,通過鎳柱親閤層析純化和腸激酶切割得到具有纖溶活性的重組蛋白Alfimeprase.首次報道在大腸桿菌中可溶錶達Alfimeprase,為以後深入研究其功能及應用奠定瞭基礎.
Alfimeprase시Fibrolase적돌변체,시일충사독섬용매,유섬용활성이무출혈성.근거Alfimeprase적안기산서렬화대장간균밀마자편애성,이용PCR적방법합성Alfimeprase DNA서렬,분별융합재NusA화MBP적C단,여분자반려FkpA재대장간균Origami B(DE3)중공표체,융합단백NusA/Alfimeprase이부분가용적형식존재,가용부분점상청총단백적25%좌우,통과얼주친합층석순화화장격매절할득도구유섬용활성적중조단백Alfimeprase.수차보도재대장간균중가용표체Alfimeprase,위이후심입연구기공능급응용전정료기출.
