南京医科大学学报（自然科学版）
南京醫科大學學報（自然科學版）
남경의과대학학보（자연과학판）
ACTA UNIVERSITATIS MEDICINALIS NANJING
2005年
11期
762-765
,共4页
陆文熊%傅赞%王若宁%德伟%赵翰林
陸文熊%傅讚%王若寧%德偉%趙翰林
륙문웅%부찬%왕약저%덕위%조한림
抑癌基因p16%人胆管癌细胞%细胞周期
抑癌基因p16%人膽管癌細胞%細胞週期
억암기인p16%인담관암세포%세포주기
目的:通过构建稳定高表达抑癌基因p16的人胆管癌细胞模型,研究p16对胆管癌细胞增殖的影响及其相关机制.方法:将抑癌基因p16的cDNA构建到高效真核表达的质粒载体pcDNA3-neo中的EcoR I/XbaI位点,构建成p16真核表达质粒pcDNA3p16;通过脂质体法将pcDNA3p16质粒转染人胆管癌细胞系QBC939,经G-418筛选,获得稳定高表达p16的人胆管癌细胞模型.用MTT法测定细胞生长曲线,并测定细胞克隆形成能力,用流式细胞光度术测定细胞周期.用Western分子杂交分析癌基因c-myc的蛋白表达水平.结果:与对照组相比,p16高表达的人胆管癌细胞QBC939的增殖受到明显抑制;流式细胞光度术表明p16的高表达导致了较为明显的G1期阻滞作用,但对细胞周期的其他时相并无影响;Western免疫印迹分析结果表明癌基因c-myc的蛋白水平表达下降.结论:抑癌基因p16下调癌基因c-myc的表达是p16抑制细胞增殖的分子机制之一.
目的:通過構建穩定高錶達抑癌基因p16的人膽管癌細胞模型,研究p16對膽管癌細胞增殖的影響及其相關機製.方法:將抑癌基因p16的cDNA構建到高效真覈錶達的質粒載體pcDNA3-neo中的EcoR I/XbaI位點,構建成p16真覈錶達質粒pcDNA3p16;通過脂質體法將pcDNA3p16質粒轉染人膽管癌細胞繫QBC939,經G-418篩選,穫得穩定高錶達p16的人膽管癌細胞模型.用MTT法測定細胞生長麯線,併測定細胞剋隆形成能力,用流式細胞光度術測定細胞週期.用Western分子雜交分析癌基因c-myc的蛋白錶達水平.結果:與對照組相比,p16高錶達的人膽管癌細胞QBC939的增殖受到明顯抑製;流式細胞光度術錶明p16的高錶達導緻瞭較為明顯的G1期阻滯作用,但對細胞週期的其他時相併無影響;Western免疫印跡分析結果錶明癌基因c-myc的蛋白水平錶達下降.結論:抑癌基因p16下調癌基因c-myc的錶達是p16抑製細胞增殖的分子機製之一.
목적:통과구건은정고표체억암기인p16적인담관암세포모형,연구p16대담관암세포증식적영향급기상관궤제.방법:장억암기인p16적cDNA구건도고효진핵표체적질립재체pcDNA3-neo중적EcoR I/XbaI위점,구건성p16진핵표체질립pcDNA3p16;통과지질체법장pcDNA3p16질립전염인담관암세포계QBC939,경G-418사선,획득은정고표체p16적인담관암세포모형.용MTT법측정세포생장곡선,병측정세포극륭형성능력,용류식세포광도술측정세포주기.용Western분자잡교분석암기인c-myc적단백표체수평.결과:여대조조상비,p16고표체적인담관암세포QBC939적증식수도명현억제;류식세포광도술표명p16적고표체도치료교위명현적G1기조체작용,단대세포주기적기타시상병무영향;Western면역인적분석결과표명암기인c-myc적단백수평표체하강.결론:억암기인p16하조암기인c-myc적표체시p16억제세포증식적분자궤제지일.
