细胞与分子免疫学杂志
細胞與分子免疫學雜誌
세포여분자면역학잡지
2005年
6期
731-733,737
,共4页
向开军%曾其毅%丁勇强%朱冰%周荣
嚮開軍%曾其毅%丁勇彊%硃冰%週榮
향개군%증기의%정용강%주빙%주영
SARS病毒%N蛋白%表达%DNA疫苗
SARS病毒%N蛋白%錶達%DNA疫苗
SARS병독%N단백%표체%DNA역묘
目的: 在大肠杆菌中表达SARS冠状病毒核衣壳N蛋白, 并构建其DNA疫苗.方法: 构建含N基因的原核表达载体pQEN, 并在大肠杆菌M15中表达N蛋白.采用Ni2+亲和层析法纯化目的蛋白.将N基因克隆入真核表达载体pSecTagB中, 构建真核重组质粒pSecN.以其免疫小鼠制备抗血清, 并用ELISA法检测其与大肠杆菌中表达的重组N蛋白及天然全病毒N蛋白的反应性.结果: 重组N蛋白能与DNA疫苗免疫的小鼠血清以及SARS患者血清发生特异性反应; SARS-CoV病毒颗粒也可与DNA疫苗免疫的小鼠血清发生特异性反应.结论: 重组N蛋白保留了病毒的一些特异性抗原表位, 可作为用ELISA法检测SARS-CoV的抗原.构建的DNA 疫苗可在小鼠体内产生高效价的抗SARS病毒N蛋白的特异性抗体, 从而为该疫苗的开发奠定了基础.
目的: 在大腸桿菌中錶達SARS冠狀病毒覈衣殼N蛋白, 併構建其DNA疫苗.方法: 構建含N基因的原覈錶達載體pQEN, 併在大腸桿菌M15中錶達N蛋白.採用Ni2+親和層析法純化目的蛋白.將N基因剋隆入真覈錶達載體pSecTagB中, 構建真覈重組質粒pSecN.以其免疫小鼠製備抗血清, 併用ELISA法檢測其與大腸桿菌中錶達的重組N蛋白及天然全病毒N蛋白的反應性.結果: 重組N蛋白能與DNA疫苗免疫的小鼠血清以及SARS患者血清髮生特異性反應; SARS-CoV病毒顆粒也可與DNA疫苗免疫的小鼠血清髮生特異性反應.結論: 重組N蛋白保留瞭病毒的一些特異性抗原錶位, 可作為用ELISA法檢測SARS-CoV的抗原.構建的DNA 疫苗可在小鼠體內產生高效價的抗SARS病毒N蛋白的特異性抗體, 從而為該疫苗的開髮奠定瞭基礎.
목적: 재대장간균중표체SARS관상병독핵의각N단백, 병구건기DNA역묘.방법: 구건함N기인적원핵표체재체pQEN, 병재대장간균M15중표체N단백.채용Ni2+친화층석법순화목적단백.장N기인극륭입진핵표체재체pSecTagB중, 구건진핵중조질립pSecN.이기면역소서제비항혈청, 병용ELISA법검측기여대장간균중표체적중조N단백급천연전병독N단백적반응성.결과: 중조N단백능여DNA역묘면역적소서혈청이급SARS환자혈청발생특이성반응; SARS-CoV병독과립야가여DNA역묘면역적소서혈청발생특이성반응.결론: 중조N단백보류료병독적일사특이성항원표위, 가작위용ELISA법검측SARS-CoV적항원.구건적DNA 역묘가재소서체내산생고효개적항SARS병독N단백적특이성항체, 종이위해역묘적개발전정료기출.
