作物学报
作物學報
작물학보
ACTA AGRONOMICA SINICA
2008年
10期
1688-1695
,共8页
于月华%陈明%李连城%徐兆师%刘阳娜%曲延英%曹新有%马有志
于月華%陳明%李連城%徐兆師%劉暘娜%麯延英%曹新有%馬有誌
우월화%진명%리련성%서조사%류양나%곡연영%조신유%마유지
大豆%DREB基因%酵母双杂交系统%互作蛋白%G蛋白β亚基
大豆%DREB基因%酵母雙雜交繫統%互作蛋白%G蛋白β亞基
대두%DREB기인%효모쌍잡교계통%호작단백%G단백β아기
从大豆(Glycine max)中克隆了一个与抗逆相关的 DREB (Dehydration Responsive Element Binding Protein)基因GmDREB5.功能分析证明,GmDREB5基因能够显著提高烟草的抗旱性和耐盐性.为了筛选GmDREB5的互作蛋白.采用酵母双杂交系统以GmDREB5蛋白73～226位氨基酸区段为诱饵筛选干旱处理的大豆cDNA文库,发现一个互作蛋白含有保守的WD40结构域,与棉花(Gossypium hirsutum)和水稻(Oryza sativa)的G蛋白β亚基分别具有61%和52%的同源性,说明蛋白可能是一类新的大豆G蛋白β亚基,将其定名为GmGβ1.将GmDREB5与GmGβ1共转化酵母菌株AH109,转化的酵母能够在四营养缺陷型培养基上(SD/trp￣leu￣his￣ade￣)正常生长,而对照小能生长;同时,共转化的酵母能够激活LacZ报告基因的表达,证明GmGβ1与GmDREB5之间存在相互作用.表达特性分析表明,GmGβ1基因受干旱、低温、高盐等胁迫和激素ABA处理的诱导而表达,证明GmGβ1不仅参与植物对非生物胁迫的响应,同时参与对GmDREB5蛋白水平的调控.
從大豆(Glycine max)中剋隆瞭一箇與抗逆相關的 DREB (Dehydration Responsive Element Binding Protein)基因GmDREB5.功能分析證明,GmDREB5基因能夠顯著提高煙草的抗旱性和耐鹽性.為瞭篩選GmDREB5的互作蛋白.採用酵母雙雜交繫統以GmDREB5蛋白73～226位氨基痠區段為誘餌篩選榦旱處理的大豆cDNA文庫,髮現一箇互作蛋白含有保守的WD40結構域,與棉花(Gossypium hirsutum)和水稻(Oryza sativa)的G蛋白β亞基分彆具有61%和52%的同源性,說明蛋白可能是一類新的大豆G蛋白β亞基,將其定名為GmGβ1.將GmDREB5與GmGβ1共轉化酵母菌株AH109,轉化的酵母能夠在四營養缺陷型培養基上(SD/trp￣leu￣his￣ade￣)正常生長,而對照小能生長;同時,共轉化的酵母能夠激活LacZ報告基因的錶達,證明GmGβ1與GmDREB5之間存在相互作用.錶達特性分析錶明,GmGβ1基因受榦旱、低溫、高鹽等脅迫和激素ABA處理的誘導而錶達,證明GmGβ1不僅參與植物對非生物脅迫的響應,同時參與對GmDREB5蛋白水平的調控.
종대두(Glycine max)중극륭료일개여항역상관적 DREB (Dehydration Responsive Element Binding Protein)기인GmDREB5.공능분석증명,GmDREB5기인능구현저제고연초적항한성화내염성.위료사선GmDREB5적호작단백.채용효모쌍잡교계통이GmDREB5단백73～226위안기산구단위유이사선간한처리적대두cDNA문고,발현일개호작단백함유보수적WD40결구역,여면화(Gossypium hirsutum)화수도(Oryza sativa)적G단백β아기분별구유61%화52%적동원성,설명단백가능시일류신적대두G단백β아기,장기정명위GmGβ1.장GmDREB5여GmGβ1공전화효모균주AH109,전화적효모능구재사영양결함형배양기상(SD/trp￣leu￣his￣ade￣)정상생장,이대조소능생장;동시,공전화적효모능구격활LacZ보고기인적표체,증명GmGβ1여GmDREB5지간존재상호작용.표체특성분석표명,GmGβ1기인수간한、저온、고염등협박화격소ABA처리적유도이표체,증명GmGβ1불부삼여식물대비생물협박적향응,동시삼여대GmDREB5단백수평적조공.
