CAJ | 학술논문

目的:建立骨骼肌蛋白分离的双向电泳(2-DE)技术体系,寻找失神经支配骨骼肌与正常骨骼肌蛋白的表达差异.方法:建立失神经腓肠肌模型,提取腓肠肌总蛋白,进行第一向等电聚焦(IEF)和第二向十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)技术分离总蛋白,使用PDQuest软件对凝胶图像进行分析,并测量了凝胶蛋白斑点在IEF和SDS-PAGE方向上的位置偏差.结果:失神经组和正常组腓肠肌组织3块凝胶的平均蛋白质点数分别为560±16和545±13,平均匹配点数分别为471±19和447±17,匹配率达84.1%和82.1%.对比分析了两种腓肠肌组织的双向电泳图谱发现,平均匹配点数为445±8;发现在失神经支配后有80个点发生了明显而稳定的质和量(大于10倍或小于0.1倍)的改变.不同凝胶间蛋白质点在IEF方向的偏差为(1.203±0.763)mm,在SDS-PAGE方向上的偏差为(1.062±0.529)mm.结论:失神经组和正常组腓肠肌的双向电泳图谱存在明显差异,失神经后表达下调的蛋白可能与维持肌肉正常功能相关,而表达上调的蛋白则可能与肌萎缩的发生过程相关.
목적:건립골격기단백분리적쌍향전영(2-DE)기술체계,심조실신경지배골격기여정상골격기단백적표체차이.방법:건립실신경비장기모형,제취비장기총단백,진행제일향등전취초(IEF)화제이향십이완기류산납취병희선알응효전영(SDS-PAGE)기술분리총단백,사용PDQuest연건대응효도상진행분석,병측량료응효단백반점재IEF화SDS-PAGE방향상적위치편차.결과:실신경조화정상조비장기조직3괴응효적평균단백질점수분별위560±16화545±13,평균필배점수분별위471±19화447±17,필배솔체84.1%화82.1%.대비분석료량충비장기조직적쌍향전영도보발현,평균필배점수위445±8;발현재실신경지배후유80개점발생료명현이은정적질화량(대우10배혹소우0.1배)적개변.불동응효간단백질점재IEF방향적편차위(1.203±0.763)mm,재SDS-PAGE방향상적편차위(1.062±0.529)mm.결론:실신경조화정상조비장기적쌍향전영도보존재명현차이,실신경후표체하조적단백가능여유지기육정상공능상관,이표체상조적단백칙가능여기위축적발생과정상관.