生物技术通报
生物技術通報
생물기술통보
BIOTECHNOLOGY BULLETIN
2004年
1期
43-46
,共4页
查宏波%李启任%王东%陈敏
查宏波%李啟任%王東%陳敏
사굉파%리계임%왕동%진민
粉叶小檗%平板克隆%克隆系%小檗碱
粉葉小檗%平闆剋隆%剋隆繫%小檗堿
분협소벽%평판극륭%극륭계%소벽감
以粉叶小檗愈伤组织为材料,用B5液体培养基进行悬浮培养建立悬浮细胞系.经3～4次继代培养即可得到悬浮的单细胞.悬浮细胞通过细胞平板克隆(一般B5培养基平板克隆,优化培养基平板克隆和条件培养基平板克隆),经5代连续继代培养观察和薄板层析-分光光度法分析,发现用优化培养基进行平板克隆植板率最高,且克隆最易成功,并且还筛选到一株小檗碱产率高且稳定的克隆CV-57,其平均生长速率为14.412mg.Fw/L.d,为原始株系的1.91倍,平均小檗碱含量为2.17%干重,是原始株系的2.26倍.
以粉葉小檗愈傷組織為材料,用B5液體培養基進行懸浮培養建立懸浮細胞繫.經3～4次繼代培養即可得到懸浮的單細胞.懸浮細胞通過細胞平闆剋隆(一般B5培養基平闆剋隆,優化培養基平闆剋隆和條件培養基平闆剋隆),經5代連續繼代培養觀察和薄闆層析-分光光度法分析,髮現用優化培養基進行平闆剋隆植闆率最高,且剋隆最易成功,併且還篩選到一株小檗堿產率高且穩定的剋隆CV-57,其平均生長速率為14.412mg.Fw/L.d,為原始株繫的1.91倍,平均小檗堿含量為2.17%榦重,是原始株繫的2.26倍.
이분협소벽유상조직위재료,용B5액체배양기진행현부배양건립현부세포계.경3～4차계대배양즉가득도현부적단세포.현부세포통과세포평판극륭(일반B5배양기평판극륭,우화배양기평판극륭화조건배양기평판극륭),경5대련속계대배양관찰화박판층석-분광광도법분석,발현용우화배양기진행평판극륭식판솔최고,차극륭최역성공,병차환사선도일주소벽감산솔고차은정적극륭CV-57,기평균생장속솔위14.412mg.Fw/L.d,위원시주계적1.91배,평균소벽감함량위2.17%간중,시원시주계적2.26배.
