科学通报
科學通報
과학통보
CHINESE SCIENCE BULLETIN
2003年
11期
1186-1190
,共5页
闫春玲%林敏%宛煜嵩%侯胜强%平淑珍%陈明%张保明%C.Elmerich
閆春玲%林敏%宛煜嵩%侯勝彊%平淑珍%陳明%張保明%C.Elmerich
염춘령%림민%완욱숭%후성강%평숙진%진명%장보명%C.Elmerich
固氮斯氏假单胞菌(Pseudomonas stutzeri)%四碳二羧酸%dct基因%固氮活性
固氮斯氏假單胞菌(Pseudomonas stutzeri)%四碳二羧痠%dct基因%固氮活性
고담사씨가단포균(Pseudomonas stutzeri)%사탄이최산%dct기인%고담활성
固氮斯氏假单胞菌(Pseudomonas stutzeri)A1501四碳二羧酸转移酶系由dctPQM基因编码.基因序列和结构分析表明,dctP,dctQ和dctM紧密连锁,并在核苷酸和氨基酸水平上与自生固氮菌棕色固氮菌的四碳二羧酸结合蛋白基因dctP和转运蛋白基因dctQM高度同源.经分析表明,DctP不含跨膜区,DctQ包含5个跨膜区,DctM包含12个跨膜区.为验证四碳二羧酸转运系统对固氮能力的增强作用,将含有完整dctPQM基因的DNA片段连接在自杀性转移质粒载体pSZ21的Tn5转座区域中,获得重组质粒pSZY6.采用三亲接合方法,经Tn5转座作用将dctPQM基因随机插入到野生型菌株A1501的染色体上,构建了重组菌株A-142.经nptⅡ基因的PCR扩增实验证明,该重组菌株确实携带了额外拷贝的dct结构基因.该重组菌株以不同浓度的琥珀酸、延胡索酸和苹果酸(20,10和5 mmol/ L)为惟一碳源生长时,其固氮活性均明显高于野生型菌株A1501,表明额外拷贝的四碳二羧酸转移酶系编码基因dctPQM能增强受体菌的固氮能力.
固氮斯氏假單胞菌(Pseudomonas stutzeri)A1501四碳二羧痠轉移酶繫由dctPQM基因編碼.基因序列和結構分析錶明,dctP,dctQ和dctM緊密連鎖,併在覈苷痠和氨基痠水平上與自生固氮菌棕色固氮菌的四碳二羧痠結閤蛋白基因dctP和轉運蛋白基因dctQM高度同源.經分析錶明,DctP不含跨膜區,DctQ包含5箇跨膜區,DctM包含12箇跨膜區.為驗證四碳二羧痠轉運繫統對固氮能力的增彊作用,將含有完整dctPQM基因的DNA片段連接在自殺性轉移質粒載體pSZ21的Tn5轉座區域中,穫得重組質粒pSZY6.採用三親接閤方法,經Tn5轉座作用將dctPQM基因隨機插入到野生型菌株A1501的染色體上,構建瞭重組菌株A-142.經nptⅡ基因的PCR擴增實驗證明,該重組菌株確實攜帶瞭額外拷貝的dct結構基因.該重組菌株以不同濃度的琥珀痠、延鬍索痠和蘋果痠(20,10和5 mmol/ L)為惟一碳源生長時,其固氮活性均明顯高于野生型菌株A1501,錶明額外拷貝的四碳二羧痠轉移酶繫編碼基因dctPQM能增彊受體菌的固氮能力.
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