厦门大学学报(自然科学版)
廈門大學學報(自然科學版)
하문대학학보(자연과학판)
JOURNAL OF XIAMEN UNIVERSITY
2008年
z2期
36-39,44
,共5页
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聚乙烯亚胺%线性%分枝状%转染效率%肝素释放
聚乙烯亞胺%線性%分枝狀%轉染效率%肝素釋放
취을희아알%선성%분지상%전염효솔%간소석방
聚乙烯亚胺(PEI)是一类新兴的阳离子多聚物非病毒载体,可缩聚DNA分子形成颗粒并转入真核细胞进行表达.本文选用分子量750 ku分枝状PEI与分子量25 ku线性PEI转染增强型绿色荧光蛋白(EGFP)报告基因于HeLa细胞,并对这两种PEI的转染效率进行比较.利用MTT法检测比较线性PEI与分枝状PEI的细胞毒性.通过凝胶阻滞实验比较两种PEI结合DNA能力.最后利用肝素介导释放实验比较两者在形成PEI/DNA复合物后释放DNA的能力.研究结果表明:线性PEI转染效率优于分枝状PEI,且随PEI/DNA质量比的增加而升高,而分枝状PEI则相反;两种PEI细胞毒性在一定范围内相近;分枝状PEI结合DNA能力略强于线性PEI;但是分枝状PEI释放DNA的能力远小于线性PEI.这可能导致DNA在细胞内无法从PEI/DNA复合体上释放出来,从而影响转录的正常进行,最终导致分枝状PEI转染效率下降.
聚乙烯亞胺(PEI)是一類新興的暘離子多聚物非病毒載體,可縮聚DNA分子形成顆粒併轉入真覈細胞進行錶達.本文選用分子量750 ku分枝狀PEI與分子量25 ku線性PEI轉染增彊型綠色熒光蛋白(EGFP)報告基因于HeLa細胞,併對這兩種PEI的轉染效率進行比較.利用MTT法檢測比較線性PEI與分枝狀PEI的細胞毒性.通過凝膠阻滯實驗比較兩種PEI結閤DNA能力.最後利用肝素介導釋放實驗比較兩者在形成PEI/DNA複閤物後釋放DNA的能力.研究結果錶明:線性PEI轉染效率優于分枝狀PEI,且隨PEI/DNA質量比的增加而升高,而分枝狀PEI則相反;兩種PEI細胞毒性在一定範圍內相近;分枝狀PEI結閤DNA能力略彊于線性PEI;但是分枝狀PEI釋放DNA的能力遠小于線性PEI.這可能導緻DNA在細胞內無法從PEI/DNA複閤體上釋放齣來,從而影響轉錄的正常進行,最終導緻分枝狀PEI轉染效率下降.
취을희아알(PEI)시일류신흥적양리자다취물비병독재체,가축취DNA분자형성과립병전입진핵세포진행표체.본문선용분자량750 ku분지상PEI여분자량25 ku선성PEI전염증강형록색형광단백(EGFP)보고기인우HeLa세포,병대저량충PEI적전염효솔진행비교.이용MTT법검측비교선성PEI여분지상PEI적세포독성.통과응효조체실험비교량충PEI결합DNA능력.최후이용간소개도석방실험비교량자재형성PEI/DNA복합물후석방DNA적능력.연구결과표명:선성PEI전염효솔우우분지상PEI,차수PEI/DNA질량비적증가이승고,이분지상PEI칙상반;량충PEI세포독성재일정범위내상근;분지상PEI결합DNA능력략강우선성PEI;단시분지상PEI석방DNA적능력원소우선성PEI.저가능도치DNA재세포내무법종PEI/DNA복합체상석방출래,종이영향전록적정상진행,최종도치분지상PEI전염효솔하강.
