癌症
癌癥
암증
CHINESE JOURNAL OF CANCER
2003年
4期
350-353
,共4页
畅晓燕%方家椿%王耐勤%刘彤%苏虹
暢曉燕%方傢椿%王耐勤%劉彤%囌虹
창효연%방가춘%왕내근%류동%소홍
8-氯腺苷%肿瘤%转录因子
8-氯腺苷%腫瘤%轉錄因子
8-록선감%종류%전록인자
背景与目的:8-氯腺苷是国内新近研发的抗肿瘤药物,其分子作用机制尚未完全阐明.本实验研究该药对 HL- 60细胞转录因子 cAMP应答元件结合蛋白 (cAMP- response- element- binding protein, CREB)活性的影响及其相关机制.方法:应用 MTT法检测 8-氯腺苷对人早幼粒细胞白血病细胞株 HL- 60的半数抑制浓度( IC50),用蛋白印迹实验( Western blot analysis)检测药物作用不同时间 CREB蛋白水平和 CREB磷酸化水平,用凝胶阻滞实验( Gel shift assay)检测药物作用不同时间 CREB与 DNA的结合水平.结果: (1)8-氯腺苷对 HL- 60细胞的 IC50约为 0.42 μ mol/L. (2)8-氯腺苷快速诱导 CREB磷酸化, 30 min达到最高水平, 6 h恢复至基础水平, CREB蛋白水平在药物作用期间保持恒定. (3)8-氯腺苷不改变 CREB与 DNA结合能力.结论: 8-氯腺苷诱导 CREB转录因子活性的提高依赖于 CREB磷酸化水平的提高,而与 CREB蛋白水平及 CREB与 DNA的结合水平无关.
揹景與目的:8-氯腺苷是國內新近研髮的抗腫瘤藥物,其分子作用機製尚未完全闡明.本實驗研究該藥對 HL- 60細胞轉錄因子 cAMP應答元件結閤蛋白 (cAMP- response- element- binding protein, CREB)活性的影響及其相關機製.方法:應用 MTT法檢測 8-氯腺苷對人早幼粒細胞白血病細胞株 HL- 60的半數抑製濃度( IC50),用蛋白印跡實驗( Western blot analysis)檢測藥物作用不同時間 CREB蛋白水平和 CREB燐痠化水平,用凝膠阻滯實驗( Gel shift assay)檢測藥物作用不同時間 CREB與 DNA的結閤水平.結果: (1)8-氯腺苷對 HL- 60細胞的 IC50約為 0.42 μ mol/L. (2)8-氯腺苷快速誘導 CREB燐痠化, 30 min達到最高水平, 6 h恢複至基礎水平, CREB蛋白水平在藥物作用期間保持恆定. (3)8-氯腺苷不改變 CREB與 DNA結閤能力.結論: 8-氯腺苷誘導 CREB轉錄因子活性的提高依賴于 CREB燐痠化水平的提高,而與 CREB蛋白水平及 CREB與 DNA的結閤水平無關.
배경여목적:8-록선감시국내신근연발적항종류약물,기분자작용궤제상미완전천명.본실험연구해약대 HL- 60세포전록인자 cAMP응답원건결합단백 (cAMP- response- element- binding protein, CREB)활성적영향급기상관궤제.방법:응용 MTT법검측 8-록선감대인조유립세포백혈병세포주 HL- 60적반수억제농도( IC50),용단백인적실험( Western blot analysis)검측약물작용불동시간 CREB단백수평화 CREB린산화수평,용응효조체실험( Gel shift assay)검측약물작용불동시간 CREB여 DNA적결합수평.결과: (1)8-록선감대 HL- 60세포적 IC50약위 0.42 μ mol/L. (2)8-록선감쾌속유도 CREB린산화, 30 min체도최고수평, 6 h회복지기출수평, CREB단백수평재약물작용기간보지항정. (3)8-록선감불개변 CREB여 DNA결합능력.결론: 8-록선감유도 CREB전록인자활성적제고의뢰우 CREB린산화수평적제고,이여 CREB단백수평급 CREB여 DNA적결합수평무관.