CAJ | 학술논문

背景与目的:染色体3p21.3区域的杂合性丢失是鼻咽癌细胞中高发和早期的细胞遗传学变异,提示缺失区域内可能存在与鼻咽癌发生相关的抑癌基因.BLU基因定位于3p21.3,蛋白质结构中含有MYND功能域.已有研究表明,BLU基因在鼻咽癌细胞中发生高频率的启动子甲基化和表达缺失.本研究构建了野生型BLU基因和其突变体的表达载体,分析BLU基因对鼻咽癌细胞恶性增殖的可能抑制作用.方法:用RT-PCR方法钓取BLU基因全长cDNA;用定点突变技术分别构建缺失MYND结构域的突变体、携带Ser402Phe点突变及缺失第405位Cys和第406位Ser的突变体、以及携带Gly160Arg点突变的BLU基因突变体的表达载体.将野生型BLU基因和MYND缺失型突变体转染鼻咽癌细胞CNE1和CNE2,用TUNEL方法检测、观察细胞凋亡情况;通过细胞计数和克隆形成实验分析稳定转染细胞的生长特性;分析稳定转染BLU基因的载体对CNE2细胞裸鼠致瘤性的影响.结果:瞬时转染野生型或MYND缺失突变型BLU基因不能诱导CNE2细胞凋亡;外源表达BLU基因对CNE2的细胞凋亡以及对CNE1、CNE2的细胞增殖和克隆形成能力均无明显影响;BLU基因对CNE2细胞的裸鼠成瘤能力也没有明显抑制作用.结论:尽管BLU基因在鼻咽癌中发生高频率变异,但其对鼻咽癌细胞的恶性增殖并没有明显抑制作用,因此该基因是否是抑癌基因,以及其在鼻咽癌发生中的作用机制和功能仍有待进一步探讨.
배경여목적:염색체3p21.3구역적잡합성주실시비인암세포중고발화조기적세포유전학변이,제시결실구역내가능존재여비인암발생상관적억암기인.BLU기인정위우3p21.3,단백질결구중함유MYND공능역.이유연구표명,BLU기인재비인암세포중발생고빈솔적계동자갑기화화표체결실.본연구구건료야생형BLU기인화기돌변체적표체재체,분석BLU기인대비인암세포악성증식적가능억제작용.방법:용RT-PCR방법조취BLU기인전장cDNA;용정점돌변기술분별구건결실MYND결구역적돌변체、휴대Ser402Phe점돌변급결실제405위Cys화제406위Ser적돌변체、이급휴대Gly160Arg점돌변적BLU기인돌변체적표체재체.장야생형BLU기인화MYND결실형돌변체전염비인암세포CNE1화CNE2,용TUNEL방법검측、관찰세포조망정황;통과세포계수화극륭형성실험분석은정전염세포적생장특성;분석은정전염BLU기인적재체대CNE2세포라서치류성적영향.결과:순시전염야생형혹MYND결실돌변형BLU기인불능유도CNE2세포조망;외원표체BLU기인대CNE2적세포조망이급대CNE1、CNE2적세포증식화극륭형성능력균무명현영향;BLU기인대CNE2세포적라서성류능력야몰유명현억제작용.결론:진관BLU기인재비인암중발생고빈솔변이,단기대비인암세포적악성증식병몰유명현억제작용,인차해기인시부시억암기인,이급기재비인암발생중적작용궤제화공능잉유대진일보탐토.