人Fas配体蛋白在大肠杆菌中的融合表达与应用
인Fas배체단백재대장간균중적융합표체여응용
The expression and application of human Fas ligand in E.coli
  • 万方数据
    细胞与分子免疫学杂志 세포여분자면역학잡지

    2003年 1期 20-22 ,共3页

    李宁丽%聂红%余奇文%柏峻%马安伦%张继英%沈佰华%王利%张冬青

    리저려%섭홍%여기문%백준%마안륜%장계영%침백화%왕리%장동청

    融合蛋白%Fas配体%细胞凋亡 融閤蛋白%Fas配體%細胞凋亡
    융합단백%Fas배체%세포조망
    目的: 在大肠杆菌中融合表达人Fas配体蛋白. 方法: 应用RT-PCR技术, 从激活的人外周血淋巴细胞中提取总RNA, 扩增Fas配体 cDNA, 克隆入PCR2.1载体.测序验证后, 克隆入带有组氨酸盒的表达载体pQE-31, 在大肠杆菌中表达, 经亲和层析柱纯化后, 用SDS-PAGE和Western blot 鉴定表达产物.结果: 表达的融合蛋白为人Fas配体, 其相对分子质量(Mr)为40 000.经透析复性后, 具有诱导Jurkat细胞凋亡的作用.用该蛋白分子免疫BALB/c小鼠制备抗血清, 以间接ELISA检测了部分自身免疫病与肿瘤患者血清中可溶性FasL的含量, 结果与进口试剂盒的灵敏性相似.结论: 获得人Fas配体蛋白, 并制备出抗FasL抗血清, 为进一步研制抗FasL单克隆抗体, 深入研究FasL的应用提供了材料.
    목적: 재대장간균중융합표체인Fas배체단백. 방법: 응용RT-PCR기술, 종격활적인외주혈림파세포중제취총RNA, 확증Fas배체 cDNA, 극륭입PCR2.1재체.측서험증후, 극륭입대유조안산합적표체재체pQE-31, 재대장간균중표체, 경친화층석주순화후, 용SDS-PAGE화Western blot 감정표체산물.결과: 표체적융합단백위인Fas배체, 기상대분자질량(Mr)위40 000.경투석복성후, 구유유도Jurkat세포조망적작용.용해단백분자면역BALB/c소서제비항혈청, 이간접ELISA검측료부분자신면역병여종류환자혈청중가용성FasL적함량, 결과여진구시제합적령민성상사.결론: 획득인Fas배체단백, 병제비출항FasL항혈청, 위진일보연제항FasL단극륭항체, 심입연구FasL적응용제공료재료.
    원문보기 원문다운로드 사이트로이동
저자의 최근 논문