CAJ | 학술논문

目的:对抗大肠癌细胞的单克隆噬菌体单链抗体进行初步鉴定和测序分析.方法:采用细胞ELISA,免疫组化,DNA序列测定和计算机分析方法,对5个单克隆噬菌体抗体(CH273,CH205,CH209,CHA12,CH723)进行初步鉴定和序列分析.结果: 5个抗体均对人大肠癌细胞、人胚肾上皮细胞和其它某些人肿瘤细胞反应,也与人正常肝细胞有弱阳性反应,但不与鼠源性的癌细胞和正常细胞反应.细胞免疫组化进一步证实了ELISA结果的正确性.大肠癌免疫组化对大肠癌组织有特异性的结合反应,而不与正常大肠组织反应.测序结果为CH273 ScFv全长732bp;V,D,J分别属于VH3-30-D1-26-JH3-linker-V1-13-JL2,GenBank序号为AY028777和AY028996;CH205全长366bp, V,D,J分别VH1-46-D6-13-JH3, GenBank序号为AF359365;CH209,CHA12和CH723的ScFv基因完全相同,全长723bp,其VH-DH-JH与CH273 ScFv基因中的VH-DH-JH完全一致,V,D,J分别属于VH3-30-D1-26-JH3-linker-L2-Jκ2, GenBank序号为AF363774.结论:噬菌体抗体具有结合人大肠癌组织和细胞的活性,为进一步开发临床应用人源抗肿瘤抗体和小分子抗体片段奠定基础.
목적:대항대장암세포적단극륭서균체단련항체진행초보감정화측서분석.방법:채용세포ELISA,면역조화,DNA서렬측정화계산궤분석방법,대5개단극륭서균체항체(CH273,CH205,CH209,CHA12,CH723)진행초보감정화서렬분석.결과: 5개항체균대인대장암세포、인배신상피세포화기타모사인종류세포반응,야여인정상간세포유약양성반응,단불여서원성적암세포화정상세포반응.세포면역조화진일보증실료ELISA결과적정학성.대장암면역조화대대장암조직유특이성적결합반응,이불여정상대장조직반응.측서결과위CH273 ScFv전장732bp;V,D,J분별속우VH3-30-D1-26-JH3-linker-V1-13-JL2,GenBank서호위AY028777화AY028996;CH205전장366bp, V,D,J분별VH1-46-D6-13-JH3, GenBank서호위AF359365;CH209,CHA12화CH723적ScFv기인완전상동,전장723bp,기VH-DH-JH여CH273 ScFv기인중적VH-DH-JH완전일치,V,D,J분별속우VH3-30-D1-26-JH3-linker-L2-Jκ2, GenBank서호위AF363774.결론:서균체항체구유결합인대장암조직화세포적활성,위진일보개발림상응용인원항종류항체화소분자항체편단전정기출.