基础医学与临床
基礎醫學與臨床
기출의학여림상
BASIC MEDICAL SCIENCES AND CLINICS
2001年
5期
428-431
,共4页
尼古丁%钙%蛋白激酶C%Ras蛋白%内皮细胞
尼古丁%鈣%蛋白激酶C%Ras蛋白%內皮細胞
니고정%개%단백격매C%Ras단백%내피세포
为研究尼古丁对血管内皮细胞胞内游离钙、蛋白激酶C(PKC)和Ras蛋白的作用,用激光共聚焦显微镜观察细胞内游离钙离子浓度的变化,用γ-32P-ATP掺入法检测PKC活性,用GST-RBD沉淀并纯化活化的Ras蛋白和Western印迹杂交法检测Ras蛋白含量.观察到(1～5)10-4mol/L尼古丁使人脐静脉内皮细胞[Ca2+]i迅速增加,峰值约超过基础值50%～200%,钙通道阻滞剂尼莫地平可拮抗尼古丁的此种效应;10-4mol/L尼古丁作用1～12h后胞浆PKC活性明显降低; 而胞膜PKC活性则升高.10-4～10-3mol/L尼古丁作用于人脐静脉内皮细胞10～30min可使活化的Ras蛋白含量增加.以上结果提示尼古丁可使人脐静脉内皮细胞[Ca2+]i增加和活化内皮细胞的PKC及Ras蛋白.
為研究尼古丁對血管內皮細胞胞內遊離鈣、蛋白激酶C(PKC)和Ras蛋白的作用,用激光共聚焦顯微鏡觀察細胞內遊離鈣離子濃度的變化,用γ-32P-ATP摻入法檢測PKC活性,用GST-RBD沉澱併純化活化的Ras蛋白和Western印跡雜交法檢測Ras蛋白含量.觀察到(1～5)10-4mol/L尼古丁使人臍靜脈內皮細胞[Ca2+]i迅速增加,峰值約超過基礎值50%～200%,鈣通道阻滯劑尼莫地平可拮抗尼古丁的此種效應;10-4mol/L尼古丁作用1～12h後胞漿PKC活性明顯降低; 而胞膜PKC活性則升高.10-4～10-3mol/L尼古丁作用于人臍靜脈內皮細胞10～30min可使活化的Ras蛋白含量增加.以上結果提示尼古丁可使人臍靜脈內皮細胞[Ca2+]i增加和活化內皮細胞的PKC及Ras蛋白.
위연구니고정대혈관내피세포포내유리개、단백격매C(PKC)화Ras단백적작용,용격광공취초현미경관찰세포내유리개리자농도적변화,용γ-32P-ATP참입법검측PKC활성,용GST-RBD침정병순화활화적Ras단백화Western인적잡교법검측Ras단백함량.관찰도(1～5)10-4mol/L니고정사인제정맥내피세포[Ca2+]i신속증가,봉치약초과기출치50%～200%,개통도조체제니막지평가길항니고정적차충효응;10-4mol/L니고정작용1～12h후포장PKC활성명현강저; 이포막PKC활성칙승고.10-4～10-3mol/L니고정작용우인제정맥내피세포10～30min가사활화적Ras단백함량증가.이상결과제시니고정가사인제정맥내피세포[Ca2+]i증가화활화내피세포적PKC급Ras단백.
