中国生物工程杂志
中國生物工程雜誌
중국생물공정잡지
JOURNAL OF CHINESE BIOTECHNOLOGY
2008年
10期
28-32
,共5页
谢丽萍%尚珂%朱春宝%朱宝泉%胡又佳
謝麗萍%尚珂%硃春寶%硃寶泉%鬍又佳
사려평%상가%주춘보%주보천%호우가
TTI%凝血酶抑制剂%抑制率
TTI%凝血酶抑製劑%抑製率
TTI%응혈매억제제%억제솔
将来源于采采蝇的TTI基因序列改造成大肠杆菌偏爱密码子,利用重组PCR方法获得TTI目的基因片段,在大肠杆菌中得到高效表达.经纯化获得了纯度高于98%的融合蛋白,建立了酶活测定方法.实验证明融合蛋白具有抑制凝血酶的活性.当凝血酶浓度为10U/ml,纯化的融合TTI体积为10μl,底物浓度为250μmol/L,融合蛋白对凝血酶的抑制率为73%,确定反应类型为竞争性抑制,Ki为35μmol/L.
將來源于採採蠅的TTI基因序列改造成大腸桿菌偏愛密碼子,利用重組PCR方法穫得TTI目的基因片段,在大腸桿菌中得到高效錶達.經純化穫得瞭純度高于98%的融閤蛋白,建立瞭酶活測定方法.實驗證明融閤蛋白具有抑製凝血酶的活性.噹凝血酶濃度為10U/ml,純化的融閤TTI體積為10μl,底物濃度為250μmol/L,融閤蛋白對凝血酶的抑製率為73%,確定反應類型為競爭性抑製,Ki為35μmol/L.
장래원우채채승적TTI기인서렬개조성대장간균편애밀마자,이용중조PCR방법획득TTI목적기인편단,재대장간균중득도고효표체.경순화획득료순도고우98%적융합단백,건립료매활측정방법.실험증명융합단백구유억제응혈매적활성.당응혈매농도위10U/ml,순화적융합TTI체적위10μl,저물농도위250μmol/L,융합단백대응혈매적억제솔위73%,학정반응류형위경쟁성억제,Ki위35μmol/L.
