胃肠病学
胃腸病學
위장병학
CHINESE JOURNAL OF GASTROENTEROLOGY
2009年
1期
39-43
,共5页
孙燕%袁耀宗%万虹宇%姚玮艳%章永平%乔敏敏
孫燕%袁耀宗%萬虹宇%姚瑋豔%章永平%喬敏敏
손연%원요종%만홍우%요위염%장영평%교민민
胰腺肿瘤%连接蛋白43%缝隙连接%RNA干扰
胰腺腫瘤%連接蛋白43%縫隙連接%RNA榦擾
이선종류%련접단백43%봉극련접%RNA간우
背景:细胞间缝隙连接由间隙连接蛋白(Cx)构成,在肿瘤侵袭和血管形成过程中起重要作用.目的:以RNA干扰技术下调人胰腺癌细胞Cx43表达,观察Cx43表达改变对胰腺癌细胞缝隙连接的影响,探讨其在胰腺癌细胞侵袭和血管形成中的作用.方法:设计靶向Cx43的小干扰RNA(siRNA)并转染人胰腺癌细胞株BxPC3,以实时定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白质印迹法检测Cx43 siRNA的干扰效果.染料传递实验检测细胞间缝隙连接,体外血管形成实验检测与BxPC3细胞共培养的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的血管生成能力,体外侵袭实验检测BxPC3细胞的侵袭能力.结果:Cx43 siRNA转染BxPC3细胞后,细胞Cx43 mRNA和蛋白表达明显下调.Cx43表达下调后,BxPC3细胞间、BxPC3细胞与HUVEC间缝隙连接显著减少;与BxPC3细胞共培养的HUVEC血管生成增多,每视野血管节点数显著高于对照组(15.69±1.09对5.24±1.32, P<0.05);BxPC3细胞的侵袭能力亦明显增强,每视野侵袭细胞数显著多于对照组(76.0±3.0对48.0±2.0, P<0.05).结论:下调Cx43表达可能通过减少细胞间缝隙连接,促进人胰腺癌细胞的侵袭和血管形成.
揹景:細胞間縫隙連接由間隙連接蛋白(Cx)構成,在腫瘤侵襲和血管形成過程中起重要作用.目的:以RNA榦擾技術下調人胰腺癌細胞Cx43錶達,觀察Cx43錶達改變對胰腺癌細胞縫隙連接的影響,探討其在胰腺癌細胞侵襲和血管形成中的作用.方法:設計靶嚮Cx43的小榦擾RNA(siRNA)併轉染人胰腺癌細胞株BxPC3,以實時定量逆轉錄聚閤酶鏈反應(RT-PCR)和蛋白質印跡法檢測Cx43 siRNA的榦擾效果.染料傳遞實驗檢測細胞間縫隙連接,體外血管形成實驗檢測與BxPC3細胞共培養的人臍靜脈內皮細胞(HUVEC)的血管生成能力,體外侵襲實驗檢測BxPC3細胞的侵襲能力.結果:Cx43 siRNA轉染BxPC3細胞後,細胞Cx43 mRNA和蛋白錶達明顯下調.Cx43錶達下調後,BxPC3細胞間、BxPC3細胞與HUVEC間縫隙連接顯著減少;與BxPC3細胞共培養的HUVEC血管生成增多,每視野血管節點數顯著高于對照組(15.69±1.09對5.24±1.32, P<0.05);BxPC3細胞的侵襲能力亦明顯增彊,每視野侵襲細胞數顯著多于對照組(76.0±3.0對48.0±2.0, P<0.05).結論:下調Cx43錶達可能通過減少細胞間縫隙連接,促進人胰腺癌細胞的侵襲和血管形成.
배경:세포간봉극련접유간극련접단백(Cx)구성,재종류침습화혈관형성과정중기중요작용.목적:이RNA간우기술하조인이선암세포Cx43표체,관찰Cx43표체개변대이선암세포봉극련접적영향,탐토기재이선암세포침습화혈관형성중적작용.방법:설계파향Cx43적소간우RNA(siRNA)병전염인이선암세포주BxPC3,이실시정량역전록취합매련반응(RT-PCR)화단백질인적법검측Cx43 siRNA적간우효과.염료전체실험검측세포간봉극련접,체외혈관형성실험검측여BxPC3세포공배양적인제정맥내피세포(HUVEC)적혈관생성능력,체외침습실험검측BxPC3세포적침습능력.결과:Cx43 siRNA전염BxPC3세포후,세포Cx43 mRNA화단백표체명현하조.Cx43표체하조후,BxPC3세포간、BxPC3세포여HUVEC간봉극련접현저감소;여BxPC3세포공배양적HUVEC혈관생성증다,매시야혈관절점수현저고우대조조(15.69±1.09대5.24±1.32, P<0.05);BxPC3세포적침습능력역명현증강,매시야침습세포수현저다우대조조(76.0±3.0대48.0±2.0, P<0.05).결론:하조Cx43표체가능통과감소세포간봉극련접,촉진인이선암세포적침습화혈관형성.
