中国眼耳鼻喉科杂志
中國眼耳鼻喉科雜誌
중국안이비후과잡지
CHINESE JOURNAL OF OPHTHALMOLOGY AND OTOLARYNGOLOGY
2009年
1期
17-19,附2-附3
,共4页
张萌%莫晓芬%郭文毅%董京艳%吴继红%方媛%张圣海%李希
張萌%莫曉芬%郭文毅%董京豔%吳繼紅%方媛%張聖海%李希
장맹%막효분%곽문의%동경염%오계홍%방원%장골해%리희
电穿孔%碱性成纤维细胞生长因子%基因治疗%视网膜神经节细胞%视网膜色素变性
電穿孔%堿性成纖維細胞生長因子%基因治療%視網膜神經節細胞%視網膜色素變性
전천공%감성성섬유세포생장인자%기인치료%시망막신경절세포%시망막색소변성
目的 以遗传性视网膜色素变性RCS大鼠为模型,探讨在体电穿孔辅助碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)基因转染视网膜神经节细胞(retinal ganglion cell,RGC)层治疗视网膜色素变性(retinitis pionentosa,RP)的可行性.方法 将编码bFGF的质粒注射至RCS大鼠右眼玻璃体腔内,左眼注射TE buffer作为对照,随即以在体电穿孔法辅助基因转染.于1周后采用Western blot、逆转录聚合酶链反应(re-verse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)半定量观察bFGF的表达,术后1、2、3、4周于光学显微镜下观察视网膜外核层的变化,术后1周用末端脱氧核苷酸转移酶介导的脱氧三磷酸尿苷缺口末端标记法(terminal deoxynucleotidyl transferasemediated dUTP nick end labeling,TUNEL)检测细胞凋亡情况.结果 术后1、2、3、4周基因治疗眼视网膜外核层较同期对照眼厚度增加,存活的光感受器数量较对照眼多(P<0.05).Western blot、RT-PCR可见bFGF蛋白和mRNA的表达.TUNEL结果显示对照眼和治疗眼外核层阳性细胞凋亡指数分别为33.58%±3.72%、12.42%±2.83%,治疗眼TUNEL阳性细胞数较对照眼明显减少(P<0.05).结论 在体电穿孔辅助bFGF基因转染RGC层能够延缓RCS大鼠视网膜色素变性的病程.(中国眼耳鼻喉科杂志,2009,9:17-19)
目的 以遺傳性視網膜色素變性RCS大鼠為模型,探討在體電穿孔輔助堿性成纖維細胞生長因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)基因轉染視網膜神經節細胞(retinal ganglion cell,RGC)層治療視網膜色素變性(retinitis pionentosa,RP)的可行性.方法 將編碼bFGF的質粒註射至RCS大鼠右眼玻璃體腔內,左眼註射TE buffer作為對照,隨即以在體電穿孔法輔助基因轉染.于1週後採用Western blot、逆轉錄聚閤酶鏈反應(re-verse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)半定量觀察bFGF的錶達,術後1、2、3、4週于光學顯微鏡下觀察視網膜外覈層的變化,術後1週用末耑脫氧覈苷痠轉移酶介導的脫氧三燐痠尿苷缺口末耑標記法(terminal deoxynucleotidyl transferasemediated dUTP nick end labeling,TUNEL)檢測細胞凋亡情況.結果 術後1、2、3、4週基因治療眼視網膜外覈層較同期對照眼厚度增加,存活的光感受器數量較對照眼多(P<0.05).Western blot、RT-PCR可見bFGF蛋白和mRNA的錶達.TUNEL結果顯示對照眼和治療眼外覈層暘性細胞凋亡指數分彆為33.58%±3.72%、12.42%±2.83%,治療眼TUNEL暘性細胞數較對照眼明顯減少(P<0.05).結論 在體電穿孔輔助bFGF基因轉染RGC層能夠延緩RCS大鼠視網膜色素變性的病程.(中國眼耳鼻喉科雜誌,2009,9:17-19)
목적 이유전성시망막색소변성RCS대서위모형,탐토재체전천공보조감성성섬유세포생장인자(basic fibroblast growth factor,bFGF)기인전염시망막신경절세포(retinal ganglion cell,RGC)층치료시망막색소변성(retinitis pionentosa,RP)적가행성.방법 장편마bFGF적질립주사지RCS대서우안파리체강내,좌안주사TE buffer작위대조,수즉이재체전천공법보조기인전염.우1주후채용Western blot、역전록취합매련반응(re-verse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)반정량관찰bFGF적표체,술후1、2、3、4주우광학현미경하관찰시망막외핵층적변화,술후1주용말단탈양핵감산전이매개도적탈양삼린산뇨감결구말단표기법(terminal deoxynucleotidyl transferasemediated dUTP nick end labeling,TUNEL)검측세포조망정황.결과 술후1、2、3、4주기인치료안시망막외핵층교동기대조안후도증가,존활적광감수기수량교대조안다(P<0.05).Western blot、RT-PCR가견bFGF단백화mRNA적표체.TUNEL결과현시대조안화치료안외핵층양성세포조망지수분별위33.58%±3.72%、12.42%±2.83%,치료안TUNEL양성세포수교대조안명현감소(P<0.05).결론 재체전천공보조bFGF기인전염RGC층능구연완RCS대서시망막색소변성적병정.(중국안이비후과잡지,2009,9:17-19)
