中国实验诊断学
中國實驗診斷學
중국실험진단학
CHINESE JOURNAL OF LABORATORY DIAGNOSIS
2009年
3期
296-299
,共4页
曹京燕%程月新%姜敏辉%姜胜华%林娜%王育林
曹京燕%程月新%薑敏輝%薑勝華%林娜%王育林
조경연%정월신%강민휘%강성화%림나%왕육림
骨髓间充质干细胞%5-氮胞苷%细胞分化%心肌样细胞
骨髓間充質榦細胞%5-氮胞苷%細胞分化%心肌樣細胞
골수간충질간세포%5-담포감%세포분화%심기양세포
目的 研究5-氮胞苷(5-Aza)对培养人骨髓间充质干细胞(MSCs)的作用,并对分化后的心肌样细胞进行鉴定.方法 采用密度梯度离心法分离到骨髓单个核细胞(MB-MNC),用含200 ml/L胎牛血清的低糖型DMEM培养液进行培养.采用差速贴壁法纯化MSCs,用流式细胞仪检测细胞表面抗原.以5-Aza诱导第3代MSCs 24 h后,继续培养.于培养的第4周,采用免疫细胞化学方法检测肌系特异性标记抗原结合蛋白(Desmin),RT-PCR检测心肌早期转录因子GATA-4和心肌特异性蛋白肌钙蛋白T(cTnT). 结果 MSCs经5-Aza诱导分化后表达Desmin、GATA-4和cTnT,未经诱导的同培养天数的MSCs中均呈未见表达.结论 MSCs经 5-Aza诱导后可以表现心肌样细胞特征.
目的 研究5-氮胞苷(5-Aza)對培養人骨髓間充質榦細胞(MSCs)的作用,併對分化後的心肌樣細胞進行鑒定.方法 採用密度梯度離心法分離到骨髓單箇覈細胞(MB-MNC),用含200 ml/L胎牛血清的低糖型DMEM培養液進行培養.採用差速貼壁法純化MSCs,用流式細胞儀檢測細胞錶麵抗原.以5-Aza誘導第3代MSCs 24 h後,繼續培養.于培養的第4週,採用免疫細胞化學方法檢測肌繫特異性標記抗原結閤蛋白(Desmin),RT-PCR檢測心肌早期轉錄因子GATA-4和心肌特異性蛋白肌鈣蛋白T(cTnT). 結果 MSCs經5-Aza誘導分化後錶達Desmin、GATA-4和cTnT,未經誘導的同培養天數的MSCs中均呈未見錶達.結論 MSCs經 5-Aza誘導後可以錶現心肌樣細胞特徵.
목적 연구5-담포감(5-Aza)대배양인골수간충질간세포(MSCs)적작용,병대분화후적심기양세포진행감정.방법 채용밀도제도리심법분리도골수단개핵세포(MB-MNC),용함200 ml/L태우혈청적저당형DMEM배양액진행배양.채용차속첩벽법순화MSCs,용류식세포의검측세포표면항원.이5-Aza유도제3대MSCs 24 h후,계속배양.우배양적제4주,채용면역세포화학방법검측기계특이성표기항원결합단백(Desmin),RT-PCR검측심기조기전록인자GATA-4화심기특이성단백기개단백T(cTnT). 결과 MSCs경5-Aza유도분화후표체Desmin、GATA-4화cTnT,미경유도적동배양천수적MSCs중균정미견표체.결론 MSCs경 5-Aza유도후가이표현심기양세포특정.
