实用临床医药杂志
實用臨床醫藥雜誌
실용림상의약잡지
JOURNAL OF JIANGSU CLINICAL MEDICINE
2010年
19期
21-24
,共4页
钱伟峰%阮坚丽%高源%黄海
錢偉峰%阮堅麗%高源%黃海
전위봉%원견려%고원%황해
慢病毒载体系统%shRNA%大肠癌细胞%STAT3
慢病毒載體繫統%shRNA%大腸癌細胞%STAT3
만병독재체계통%shRNA%대장암세포%STAT3
目的 观察慢病毒介导shRNA沉默STAT3表达对大肠癌HT-29细胞生长的影响.方法 将pRNAT-shSTAT3重组慢病毒质粒进行包装产生病毒液,测定其滴度,感染大肠癌HT-29细胞,筛选获得阳性细胞株,实时定量PCR和Western blot 检测shRNA对STAT3基因的沉默效率, MTT法检测细胞生长情况,流式细胞仪检测细胞周期变化.结果 成功包装慢病毒,其病毒悬液的滴度为2×107 TU/mL.病毒液感染大肠癌HT-29细胞,经G418筛选获得稳定细胞株,实时定量PCR和Western blot结果分别显示HT-29细胞STAT3mRNA表达和蛋白明显减弱,表达量分别为(16.9±2.1)%、(18.8±2.4)%(P＜0.01).MTT结果显示STAT3基因沉默后的大肠癌HT-29细胞生长明显减慢, G0/G1期细胞占(68.73±2.88)%, S期细胞占22.93±1.10%, 与对照组相比差异显著(P＜0.01).结论 慢病毒介导shRNA沉默STAT3表达对大肠癌HT-29细胞生长有明显的影响,细胞生长速度明显减慢,细胞阻滞于G0/G1期.
目的 觀察慢病毒介導shRNA沉默STAT3錶達對大腸癌HT-29細胞生長的影響.方法 將pRNAT-shSTAT3重組慢病毒質粒進行包裝產生病毒液,測定其滴度,感染大腸癌HT-29細胞,篩選穫得暘性細胞株,實時定量PCR和Western blot 檢測shRNA對STAT3基因的沉默效率, MTT法檢測細胞生長情況,流式細胞儀檢測細胞週期變化.結果 成功包裝慢病毒,其病毒懸液的滴度為2×107 TU/mL.病毒液感染大腸癌HT-29細胞,經G418篩選穫得穩定細胞株,實時定量PCR和Western blot結果分彆顯示HT-29細胞STAT3mRNA錶達和蛋白明顯減弱,錶達量分彆為(16.9±2.1)%、(18.8±2.4)%(P＜0.01).MTT結果顯示STAT3基因沉默後的大腸癌HT-29細胞生長明顯減慢, G0/G1期細胞佔(68.73±2.88)%, S期細胞佔22.93±1.10%, 與對照組相比差異顯著(P＜0.01).結論 慢病毒介導shRNA沉默STAT3錶達對大腸癌HT-29細胞生長有明顯的影響,細胞生長速度明顯減慢,細胞阻滯于G0/G1期.
목적 관찰만병독개도shRNA침묵STAT3표체대대장암HT-29세포생장적영향.방법 장pRNAT-shSTAT3중조만병독질립진행포장산생병독액,측정기적도,감염대장암HT-29세포,사선획득양성세포주,실시정량PCR화Western blot 검측shRNA대STAT3기인적침묵효솔, MTT법검측세포생장정황,류식세포의검측세포주기변화.결과 성공포장만병독,기병독현액적적도위2×107 TU/mL.병독액감염대장암HT-29세포,경G418사선획득은정세포주,실시정량PCR화Western blot결과분별현시HT-29세포STAT3mRNA표체화단백명현감약,표체량분별위(16.9±2.1)%、(18.8±2.4)%(P＜0.01).MTT결과현시STAT3기인침묵후적대장암HT-29세포생장명현감만, G0/G1기세포점(68.73±2.88)%, S기세포점22.93±1.10%, 여대조조상비차이현저(P＜0.01).결론 만병독개도shRNA침묵STAT3표체대대장암HT-29세포생장유명현적영향,세포생장속도명현감만,세포조체우G0/G1기.
