中山大学学报(医学科学版)
中山大學學報(醫學科學版)
중산대학학보(의학과학판)
JOURNAL OF SUN YAT-SEN UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCES)
2010年
6期
878-883
,共6页
张波%范新兰%林天歆%许可慰%黄健
張波%範新蘭%林天歆%許可慰%黃健
장파%범신란%림천흠%허가위%황건
PC-3%前列腺癌%悬浮培养%聚球法%肿瘤干细胞%富集%鉴定
PC-3%前列腺癌%懸浮培養%聚毬法%腫瘤榦細胞%富集%鑒定
PC-3%전렬선암%현부배양%취구법%종류간세포%부집%감정
[目的]从人前列腺癌PC-3细胞系中分离、富集并鉴定前列腺癌干细胞.[方法]采用无血清培养液(SFM)悬浮细胞聚球法体外培养PC-3细胞系,通过传代更新、诱导分化、交替在含血清/无血清培养液中培养等方法鉴定PC-3悬浮成球细胞具有强增殖性、自我更新和分化潜能等肿瘤干细胞特性.以PC-3悬浮成球细胞为实验组,常规在含血清培养液(SSM)中单层贴壁培养的PC-3细胞为对照组,采用流式细胞术检测两种细胞中CD44+CD133+细胞及侧群(SP)细胞比例.[结果]PC-3成球细胞可以在SFM中生存并形成悬浮细胞球,悬浮培养第5天时开始可以观察到典型的悬浮细胞球形成,第10天时细胞球形成效率约为(2.6±1.0)%,较第5天时明显增多(P<0.05).PC-3悬浮成球细胞具有自我更新和分化能力,在体外可以连续、稳定传代,在SFM中滴加血清后可以分化.交替培养于SSM和SFM中可以实现与贴壁细胞之间的相互转化.PC-3悬浮成球细胞中CD44+CD133+细胞比率为13.94%,SP细胞含量为3.1%,均显著高于常规培养的PC-3贴壁细胞(分别为0.77%和0.0%,P<0.05).[结论]PC-3悬浮成球细胞具有肿瘤干细胞特性,采用无血清悬浮细胞聚球培养法可以从PC-3细胞系中简便、高效地富集前列腺癌干细胞.
[目的]從人前列腺癌PC-3細胞繫中分離、富集併鑒定前列腺癌榦細胞.[方法]採用無血清培養液(SFM)懸浮細胞聚毬法體外培養PC-3細胞繫,通過傳代更新、誘導分化、交替在含血清/無血清培養液中培養等方法鑒定PC-3懸浮成毬細胞具有彊增殖性、自我更新和分化潛能等腫瘤榦細胞特性.以PC-3懸浮成毬細胞為實驗組,常規在含血清培養液(SSM)中單層貼壁培養的PC-3細胞為對照組,採用流式細胞術檢測兩種細胞中CD44+CD133+細胞及側群(SP)細胞比例.[結果]PC-3成毬細胞可以在SFM中生存併形成懸浮細胞毬,懸浮培養第5天時開始可以觀察到典型的懸浮細胞毬形成,第10天時細胞毬形成效率約為(2.6±1.0)%,較第5天時明顯增多(P<0.05).PC-3懸浮成毬細胞具有自我更新和分化能力,在體外可以連續、穩定傳代,在SFM中滴加血清後可以分化.交替培養于SSM和SFM中可以實現與貼壁細胞之間的相互轉化.PC-3懸浮成毬細胞中CD44+CD133+細胞比率為13.94%,SP細胞含量為3.1%,均顯著高于常規培養的PC-3貼壁細胞(分彆為0.77%和0.0%,P<0.05).[結論]PC-3懸浮成毬細胞具有腫瘤榦細胞特性,採用無血清懸浮細胞聚毬培養法可以從PC-3細胞繫中簡便、高效地富集前列腺癌榦細胞.
[목적]종인전렬선암PC-3세포계중분리、부집병감정전렬선암간세포.[방법]채용무혈청배양액(SFM)현부세포취구법체외배양PC-3세포계,통과전대경신、유도분화、교체재함혈청/무혈청배양액중배양등방법감정PC-3현부성구세포구유강증식성、자아경신화분화잠능등종류간세포특성.이PC-3현부성구세포위실험조,상규재함혈청배양액(SSM)중단층첩벽배양적PC-3세포위대조조,채용류식세포술검측량충세포중CD44+CD133+세포급측군(SP)세포비례.[결과]PC-3성구세포가이재SFM중생존병형성현부세포구,현부배양제5천시개시가이관찰도전형적현부세포구형성,제10천시세포구형성효솔약위(2.6±1.0)%,교제5천시명현증다(P<0.05).PC-3현부성구세포구유자아경신화분화능력,재체외가이련속、은정전대,재SFM중적가혈청후가이분화.교체배양우SSM화SFM중가이실현여첩벽세포지간적상호전화.PC-3현부성구세포중CD44+CD133+세포비솔위13.94%,SP세포함량위3.1%,균현저고우상규배양적PC-3첩벽세포(분별위0.77%화0.0%,P<0.05).[결론]PC-3현부성구세포구유종류간세포특성,채용무혈청현부세포취구배양법가이종PC-3세포계중간편、고효지부집전렬선암간세포.