西北植物学报
西北植物學報
서북식물학보
ACTA BOTANICA BOREALI-OCCIDENTALIA SINICA
2003年
11期
1877-1881
,共5页
杨颖丽%张峰%赵敏桂%谢能中%张立新
楊穎麗%張峰%趙敏桂%謝能中%張立新
양영려%장봉%조민계%사능중%장립신
胡杨%愈伤组织%质膜%H+-ATPase
鬍楊%愈傷組織%質膜%H+-ATPase
호양%유상조직%질막%H+-ATPase
以胡杨愈伤组织为材料,用PEG 3350/DextranT 500构成的两相系统提取质膜微囊,研究质膜H+-ATPase的特性.结果显示:由6.3% PEG 3350、6.3% Dextran T500、KCl、磷酸缓冲液(pH 7.8)和蔗糖构成的两相系统提取膜微囊的H+-ATPase活性分别被Na3VO4、KNO3、NaN3抑制了约75%、2.6%和1.3%.方向性检测显示原位膜微囊占提取质膜微囊的90%,翻转膜微囊仅占10%.去垢剂对质膜H+-ATPase活性的影响说明0.015%的Triton X-100和0.01%～0.1%的Brij 58适用于测定质膜H+-ATPase活性.Lineweaver-Burk动力学分析该酶的Km值为0.65 mmol*L-1,Vmax为37.59 μmol Pi*mg-1 protein*h-1.研究结果表明:两相法提取的质膜微囊主要是正向密闭的膜微囊;胡杨愈伤组织质膜H+-ATPase的最适pH为6.5,最适温度为37℃左右.
以鬍楊愈傷組織為材料,用PEG 3350/DextranT 500構成的兩相繫統提取質膜微囊,研究質膜H+-ATPase的特性.結果顯示:由6.3% PEG 3350、6.3% Dextran T500、KCl、燐痠緩遲液(pH 7.8)和蔗糖構成的兩相繫統提取膜微囊的H+-ATPase活性分彆被Na3VO4、KNO3、NaN3抑製瞭約75%、2.6%和1.3%.方嚮性檢測顯示原位膜微囊佔提取質膜微囊的90%,翻轉膜微囊僅佔10%.去垢劑對質膜H+-ATPase活性的影響說明0.015%的Triton X-100和0.01%～0.1%的Brij 58適用于測定質膜H+-ATPase活性.Lineweaver-Burk動力學分析該酶的Km值為0.65 mmol*L-1,Vmax為37.59 μmol Pi*mg-1 protein*h-1.研究結果錶明:兩相法提取的質膜微囊主要是正嚮密閉的膜微囊;鬍楊愈傷組織質膜H+-ATPase的最適pH為6.5,最適溫度為37℃左右.
이호양유상조직위재료,용PEG 3350/DextranT 500구성적량상계통제취질막미낭,연구질막H+-ATPase적특성.결과현시:유6.3% PEG 3350、6.3% Dextran T500、KCl、린산완충액(pH 7.8)화자당구성적량상계통제취막미낭적H+-ATPase활성분별피Na3VO4、KNO3、NaN3억제료약75%、2.6%화1.3%.방향성검측현시원위막미낭점제취질막미낭적90%,번전막미낭부점10%.거구제대질막H+-ATPase활성적영향설명0.015%적Triton X-100화0.01%～0.1%적Brij 58괄용우측정질막H+-ATPase활성.Lineweaver-Burk동역학분석해매적Km치위0.65 mmol*L-1,Vmax위37.59 μmol Pi*mg-1 protein*h-1.연구결과표명:량상법제취적질막미낭주요시정향밀폐적막미낭;호양유상조직질막H+-ATPase적최괄pH위6.5,최괄온도위37℃좌우.
