第二军医大学学报
第二軍醫大學學報
제이군의대학학보
ACADEMIC JOURNAL OF SECOND MILITARY MEDICAL UNIVERSITY
2004年
2期
136-139
,共4页
李雅慧%黎怀星%吴丹%施柯%蔡东联%孙树汉
李雅慧%黎懷星%吳丹%施柯%蔡東聯%孫樹漢
리아혜%려부성%오단%시가%채동련%손수한
小分子干涉RNA%Retn基因%基因表达
小分子榦涉RNA%Retn基因%基因錶達
소분자간섭RNA%Retn기인%기인표체
目的:设计小鼠Retn基因特异性的siRNAs,并构建一系列能在哺乳动物细胞内稳定表达这些siRNAs的表达质粒,以便为在体外研究Retn基因的功能打下基础.方法:(1)设计并合成小鼠Retn基因特异性的一组寡核苷酸片段,并克隆到pSilencerEM1.0-Neo载体;(2)用电穿孔转染和G418筛选等方法建立能稳定表达相应siRNAs的一组3T3-L1细胞克隆;(3)诱导细胞分化为脂肪细胞,并用RT-PCR分析这些脂肪细胞内Retn基因的mRNA水平.结果:设计并构建了4个小鼠Retn基因特异性的siRNAs表达质粒,并证明其中的2种质粒能在脂肪细胞内稳定表达相应的siRNAs,显著地抑制了这些脂肪细胞内Retn基因的mRNA水平.结论:本研究设计并构建出的小鼠Retn基因特异性的siRNAs表达载体,所表达的siRNAs具有较强的RNA干涉功能,为Retn基因的功能研究奠定了实验基础.
目的:設計小鼠Retn基因特異性的siRNAs,併構建一繫列能在哺乳動物細胞內穩定錶達這些siRNAs的錶達質粒,以便為在體外研究Retn基因的功能打下基礎.方法:(1)設計併閤成小鼠Retn基因特異性的一組寡覈苷痠片段,併剋隆到pSilencerEM1.0-Neo載體;(2)用電穿孔轉染和G418篩選等方法建立能穩定錶達相應siRNAs的一組3T3-L1細胞剋隆;(3)誘導細胞分化為脂肪細胞,併用RT-PCR分析這些脂肪細胞內Retn基因的mRNA水平.結果:設計併構建瞭4箇小鼠Retn基因特異性的siRNAs錶達質粒,併證明其中的2種質粒能在脂肪細胞內穩定錶達相應的siRNAs,顯著地抑製瞭這些脂肪細胞內Retn基因的mRNA水平.結論:本研究設計併構建齣的小鼠Retn基因特異性的siRNAs錶達載體,所錶達的siRNAs具有較彊的RNA榦涉功能,為Retn基因的功能研究奠定瞭實驗基礎.
목적:설계소서Retn기인특이성적siRNAs,병구건일계렬능재포유동물세포내은정표체저사siRNAs적표체질립,이편위재체외연구Retn기인적공능타하기출.방법:(1)설계병합성소서Retn기인특이성적일조과핵감산편단,병극륭도pSilencerEM1.0-Neo재체;(2)용전천공전염화G418사선등방법건립능은정표체상응siRNAs적일조3T3-L1세포극륭;(3)유도세포분화위지방세포,병용RT-PCR분석저사지방세포내Retn기인적mRNA수평.결과:설계병구건료4개소서Retn기인특이성적siRNAs표체질립,병증명기중적2충질립능재지방세포내은정표체상응적siRNAs,현저지억제료저사지방세포내Retn기인적mRNA수평.결론:본연구설계병구건출적소서Retn기인특이성적siRNAs표체재체,소표체적siRNAs구유교강적RNA간섭공능,위Retn기인적공능연구전정료실험기출.
