CAJ | 학술논문

Apoptin是一种来源于鸡贫血病毒的小蛋白,在肿瘤细胞中定位于细胞核,而在正常细胞中主要分布于细胞质.根据预测,Apoptin分子中有2段序列(NLS1和NLS2)可能是单组分核定位信号.通过基因突变和缺失构建了Apoptin各种不同的核定位信号突变体和磷酸化突变体,利用增强型绿色荧光蛋白(EGFP)作标签,观察了其在肿瘤细胞中亚细胞定位的变化.结果表明,NLS1和NLS2单独均不是有效的单组分核定位信号.Apoptin的核定位信号是由NLS1和NLS2这2段序列共同组成的双组分核定位信号,缺少任何一段序列都会严重影响Apoptin在肿瘤细胞中的核定位.其中,NLS2对于Apoptin的核定位起主要作用.Apoptin的获得型磷酸化突变体并不能转位到正常细胞的细胞核中,而其磷酸化负突变体仍定位于肿瘤细胞的细胞核.另外,丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶抑制剂H7也不影响Apoptin在肿瘤细胞中的核定位.很可能,Apoptin的磷酸化并不参与调控其核定位信号的功能.
Apoptin시일충래원우계빈혈병독적소단백,재종류세포중정위우세포핵,이재정상세포중주요분포우세포질.근거예측,Apoptin분자중유2단서렬(NLS1화NLS2)가능시단조분핵정위신호.통과기인돌변화결실구건료Apoptin각충불동적핵정위신호돌변체화린산화돌변체,이용증강형록색형광단백(EGFP)작표첨,관찰료기재종류세포중아세포정위적변화.결과표명,NLS1화NLS2단독균불시유효적단조분핵정위신호.Apoptin적핵정위신호시유NLS1화NLS2저2단서렬공동조성적쌍조분핵정위신호,결소임하일단서렬도회엄중영향Apoptin재종류세포중적핵정위.기중,NLS2대우Apoptin적핵정위기주요작용.Apoptin적획득형린산화돌변체병불능전위도정상세포적세포핵중,이기린산화부돌변체잉정위우종류세포적세포핵.령외,사안산/소안산단백격매억제제H7야불영향Apoptin재종류세포중적핵정위.흔가능,Apoptin적린산화병불삼여조공기핵정위신호적공능.