禽流感病毒、新城疫病毒、猪瘟病毒和口蹄疫病毒多联RT-PCR诊断技术的建立
금류감병독、신성역병독、저온병독화구제역병독다련RT-PCR진단기술적건립
Establishment of Multiple RT-PCR Diagnostic Techniques for Avian influenza virus (AIV), Newcastle disease virus (NDV), Classical swine fever virus (CSFV) and Food and mouth disease virus (FMDV)
  • 万方数据
    农业生物技术学报 농업생물기술학보
    JOURNAL OF AGRICULTURAL BIOTECHNOLOGY
    2005年 1期 92-95 ,共4页

    刘维全%刘海鹏%江禹%王本旭%王吉贵%杨淑艳%孙绍光%涂长春%刘芃芃

    류유전%류해붕%강우%왕본욱%왕길귀%양숙염%손소광%도장춘%류봉봉

    禽流感病毒%新城疫病毒%猪瘟病毒%口蹄疫病毒%多联RT-PCR 禽流感病毒%新城疫病毒%豬瘟病毒%口蹄疫病毒%多聯RT-PCR
    금류감병독%신성역병독%저온병독%구제역병독%다련RT-PCR
    选择禽流感病毒(AIV)、新城疫病毒(NDV)、猪瘟病毒(CSFV)和口蹄疫病毒(FMDV)基因组序列高保守区,按照多联PCR引物的设计要求,利用DNAsis计算机软件设计并合成了4对特异性扩增引物,扩增片段大小分别为470、320、200和140bp.以AIV、NDV、CSFV和FMDV的培养物提取RNA并反转录,进行RT-PCR特异性扩增.结果表明,各单项RT-PCR扩增产物与设计的4对引物之间的序列大小一致.在分别建立了各病毒单项RT-PCR及AIV与NDV、CSFV与FMDV二联RT-PCR的基础上,进一步优化各种多联PCR扩增条件,成功建立了上述4种病毒的四联RT-PCR技术.经特异性和灵敏度实验证明,本方法具有高度的特异性和灵敏性,其灵敏度为10 pg总RNA.在3 h内即可完成样品的检测.
    선택금류감병독(AIV)、신성역병독(NDV)、저온병독(CSFV)화구제역병독(FMDV)기인조서렬고보수구,안조다련PCR인물적설계요구,이용DNAsis계산궤연건설계병합성료4대특이성확증인물,확증편단대소분별위470、320、200화140bp.이AIV、NDV、CSFV화FMDV적배양물제취RNA병반전록,진행RT-PCR특이성확증.결과표명,각단항RT-PCR확증산물여설계적4대인물지간적서렬대소일치.재분별건립료각병독단항RT-PCR급AIV여NDV、CSFV여FMDV이련RT-PCR적기출상,진일보우화각충다련PCR확증조건,성공건립료상술4충병독적사련RT-PCR기술.경특이성화령민도실험증명,본방법구유고도적특이성화령민성,기령민도위10 pg총RNA.재3 h내즉가완성양품적검측.
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